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专利号: 2015107402471
申请人: 合肥学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,所合成的人工抗体中的聚苯乙烯(Polystyrene,PS)微球表面包覆纳米SiO2壳层,形成芯-壳结构,其特征在于:所述的人工抗体中洗脱位于SiO2壳层中的印记分子,SiO2壳层的内部形成具有与印记分子结构、大小和功能基互补的空穴结构,洗脱印记分子的人工抗体具有对目标分析物分子的特异性识别位点,实现对目标分析物分子选择性识别和探测,本发明的制备过程包括如下两个步骤:

1.1第一步是PS微球的合成:首先,将8 mL ~ 12 mL苯乙烯、0.5 mL ~ 1.5 mL丙烯酸和80 mL ~ 100 mL去离子水分别加入到250 mL带有磨口塞的锥形瓶中,超声分散5 min ~

10 min后,形成混合乳液,然后,用精度为万分之一电子天平称取0.0500 g ~ 0.0800 g的引发剂加入到上述混合乳液中,通入10 min ~ 15 min的高纯氮气,去除混合乳液中的氧气后,将锥形瓶密封后放置在可程序升温摇床中,聚合时设置程序升温至70 ℃,在摇床中以

300 rpm条件下聚合反应12 h ~ 15 h,最后,在80 ℃和300 rpm条件下熟化2 h ~ 3 h,将所得到聚合反应产物分别均分至三支50 mL离心管中,离心去除未反应底物、再用工业乙醇超声分散,如此反复3次,最后分别在上述离心洗涤后的聚合反应产物中加入40 mL去离子水,超声分散得到了单分散的、圆球形的表面带有功能基团PS微球悬浮液;

1.2第二步是目标分析物分子印记的PS@SiO2复合微球的合成:从上述洗净后分散在50 mL的离心管中取10 mL的PS微球悬浮液,移入到250 mL的锥形瓶中,超声分散-1 -1

5 min ~ 10 min,再用浓度为1 molL ~ 2 molL 强碱调节pH值至10,然后分别量取4 mL ~ 6 mL的印记分子,80 mL的无水乙醇,150 uL ~ 200 uL的正硅酸乙酯(tetraethyl orthosilicate, TEOS),2 mL的氨水移入到上述锥形瓶混合溶液中,将锥形瓶用磨口塞塞紧,并用保鲜膜包裹,再用橡皮筋缠绕包扎,最后将密封好的锥形瓶放置摇床中在室温下以

300 rpm震荡反应13 h ~ 15h,制得在PS微球的表面包覆了一层均匀的SiO2外壳,形成壳层厚度可控的分子印记的芯-壳型PS@SiO2复合微球;

将所得到PS@SiO2复合微球分别均分至三支50 mL离心管中,离心去除未反应底物、再用工业乙醇超声分散,如此反复3次,最后分别在上述离心洗涤后的复合微球中加入20 mL去离子水,超声分散,分别再加入适量的乙酸,放置摇床中在室温下以300 rpm震荡1h ~

2h,将印记分子从印记位点中洗脱至溶液中,再将洗脱后的溶液以8000 rpm ~ 10000 rpm转速离心5min ~ 10min,离心后的溶液倒去上清液,然后用无水乙醇超声、离心、洗涤3次,最后再用去离子水超声、离心、洗涤3次,得到具有选择性识别印记分子的芯-壳型PS@SiO2人工抗体。

2.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中苯乙烯是已经除去了阻聚剂,固体杂质和聚合物。

3.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中目标分析物分子和印记分子是百草枯分子。

4.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中引发剂是过硫酸铵。

5.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中PS微球表面携带的功能基团为羧基。

6.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中PS微球表面所携带负电的功能基团羧基与带正电的目标分析物百草枯分子通过阴阳离子对的静电引力相互作用。

7.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中芯-壳型PS@SiO2复合微球的SiO2壳层厚度可以通过调节TEOS的量来控制。

8.根据权利要求1所述的一种用于探测百草枯分子的PS@SiO2人工抗体的制备方法,其特征是:所说的制备的人工抗体中调节溶液pH值的强碱是NaOH。