1.一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法,由下述步骤组成:
(1)制备金钠米粒子
将新鲜柑橘成熟果实的外皮烘干后粉碎,过40目筛,浸泡于去离子水中,橘子皮与去离子水质量比为1:10,浸泡1-2小时,再将浸泡液于4000 rpm条件下,离心3分钟,取上清液,此上清液作为浸泡液母液;采用去离子水将浸泡液母液稀释1倍获得所需工作液,冰箱4℃条件下保存;
室温条件下,将4℃、浓度为1g/ml的氯金酸溶液置于反应皿中,伴随磁力搅拌器温和搅动100-150rpm;2分钟后,迅速将工作液加入氯金酸溶液中,氯金酸溶液与工作液的体积比为3:1-6:1,随即观察颜色的变化,即由黄色变为紫色再变为浅酒红色,当体系颜色出现浅酒红色时,搅拌速度提升到300-350rpm,10 分钟后结束反应,获得金纳米粒子溶液,金纳米粒子溶液颜色为浅酒红色,置于冰箱4℃保存备用;
(2)测定金钠米粒子的紫外吸收光谱
吸取步骤(1)所制备的金纳米粒子溶液,加入到比色皿中,再加入去离子水,金纳米粒子溶液与蒸馏水体积比为1:2,混合均匀后,置于紫外-可见光分光光度计中测定吸光度,测得结果金纳米粒子吸收峰在520-550nm;
(3)比色探针法检测久效磷残留
底物的预处理:
首先选择碘化硫代乙酰胆碱作为反应底物,采用去离子水配置10 mM的ATChI溶液100 mL,向5ml 的ATChI溶液中加入18 mg硝酸银粉末,充分振荡10秒钟,竖直静置1分钟后离心去沉淀,取上清液,再向上清液中加入1 mg 氯化钠,充分振荡10秒钟,竖直静置1分钟后离心去沉淀,取上清液,此时上清液为含有ATCh+的溶液;
金纳米粒子比色法的建立:
分别向离心管中加入无菌水,久效磷工作液和乙酰胆碱酯酶缓冲液后等待10 分钟,再加入ATCh+溶液,等待10分钟后,加入金纳米粒子溶液,记录颜色变化,伴随着久效磷浓度的提高,颜色逐渐由浅酒红色转变至紫色再变为深蓝色。
2.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法,其特征在于:用无菌水配制的久效磷工作液浓度为0.01mg/mL;用浓度为0.1mol/L的磷酸缓冲液配制浓度为2 U/mL的乙酰胆碱酯酶缓冲液;0.1mol/L磷酸缓冲液的配制:100mL的磷酸缓冲液需0.1mol/L K2HPO4水溶液80.2mL和0.1mol/L KH2PO4的水溶液19.8mL。
3.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法,其特征在于:金纳米粒子比色法的建立:无菌水、久效磷工作液、乙酰胆碱酯酶缓冲液、ATCh+溶液、金纳米粒子溶液的体积比为5:10:1:1:4。
4.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法,其特征在于:制备后金纳米粒子在6天内具备稳定性,能够正常使用。
5.根据权利要求1所述的一种金纳米粒子探针比色法检测久效磷残留的方法,其特征在于:金纳米粒子探针比色法检测久效磷最低浓度为0.00005 mg/mL。