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专利号: 2015108617305
申请人: 朝阳市德凤生态养殖有限责任公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2025-03-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种仔猪饲用微生态发酵剂,其特征在于,按照重量份数计由如下原料配制而成:

2.如权利要求1所述的仔猪饲用微生态发酵剂的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:步骤一、一级培养

(1)配制PDA固体培养基

A1、取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml;80℃浸泡1h,用纱布过滤,然后补足失水至1000ml;100Pa灭菌20min,即得20%马铃薯浸汁,贮存备用;

A2、按每100ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后按每100ml马铃薯浸汁加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水;

A3、分装、加塞、包扎;

A4、高压蒸汽灭菌,100Pa灭菌20min;

A5、卧斜,待冷却后30℃恒温培养24h,排除冷凝水,观察试管培养基表面光滑无菌则可以进行接菌;

(2)斜面接种

将各菌种分别斜面接种,30℃恒温培养24~72h;

步骤二、二级培养

(1)三角瓶的制作工艺

B1、装料:按照重量比,麸皮:水=1:1的比例将两者进行拌料,每千克混合料加入2ml浓硫酸;

B2、装入三角瓶内高度为20~25cm,装料为50g/瓶;

B3、棉塞堵塞封口,再用16层无菌纱布封口;

B4、高压蒸汽灭菌,100Pa灭菌20min。自然冷却;

B5、接菌,接菌量每1g斜面接种20~25g物料;

B6、28~32℃恒温培养,培养过程中每两个小时摇三角瓶一次,摊平;至24小时后扣瓶,培养6小时后扣瓶,全程36小时,得到种曲,粉碎后过40~60目筛,并测定样品酶活力;

其中,按照国标方法酶活力定义如下:

木聚糖酶活力:在37℃和pH5.5条件下,每分钟从浓度为5mg/ml的木聚糖溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u;

果胶酶活力:在37℃和pH5.5条件下,每分钟从浓度为4mg/ml的聚半乳糖醛酸溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u;

纤维素酶活力:在37℃和pH5.5条件下,每分钟从浓度为4mg/ml的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u;

淀粉酶活力:在37℃、pH6.8的条件下,每分钟水解淀粉生成1mg还原糖所需的酶量;

8

所得二级发酵产物要求细菌总数≥10cfu/g,总酶活≥500u/g,低于此标准不在用于进行三级接种培养;

步骤三、三级培养

(1)筐式培养基的制作

B1、装料:按照重量比将麸皮:水=5:3的比例进行拌料,每公斤混合料加入2ml浓硫酸、1%硫酸铵;

B2、高压灭菌100Pa,20min,自然冷却;

B3、装入筐中高度2~3cm的培养基;

B5、按筐式培养基物料重量的10%进行接菌;

(2)培养

B1、室温培养,控制室内相对湿度50~85%,培养过程中,堆积培养,每6小时翻拌一次,至18小时,待其连饼后将其划碎,36小时候扣筐继续培养至72小时,得固态发酵产物,将其粉碎后过40~60目筛,并测定样品酶活力;所得三级发酵产物要求细菌总数8

≥10cfu/g,总酶活≥500u/g,低于此标准不再在用于进行四级接种培养;

步骤四、四级培养

将三级培养的各菌株用石膏粉作为载体按照重量比三级培养产物:石膏粉=1:10混合,进行四级培养,四级培养培养基按重量组成为麸皮:玉米面=1:1,加入和硫酸,水占麸皮玉米面混合物料总重量的50%~70%,硫酸占麸皮玉米面混合物料总重量的1%。

3.如权利要求1所述的仔猪饲用微生态发酵剂制备的活性固态发酵饲料,其特征在于,由如下重量百分比的原料组成: