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专利号: 2016100587467
申请人: 常州大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种毛细管电泳检测凝血酶与G‐四链体结合速率的方法,其特征在于:所述检测步骤如下:(1)选取带有荧光染料的DNA序列FAM-F29;

(2)将步骤(1)所述的FAM-F29在5mM浓度的Na+、K+盐溶液中反应24小时,得到含有G‐四链体结构的DNA荧光探针溶液;

(3)将粉末状的凝血酶溶解于Tris-HCl缓冲溶液中,稀释成不同浓度的凝血酶溶液;

(4)将步骤(2)所述的G-四链体结构的DNA荧光探针溶液与步骤(3)所述的凝血酶溶液混合,得到凝血酶与G-四链体结构的DNA荧光探针复合物;

(5)荧光毛细管电泳检测:将步骤(4)所述的复合物用荧光毛细管电泳检测,测定混合物通过检测通道峰面积与总的DNA通过检测通道的峰值面积之比,进行线性拟合,绘制峰面积比—时间的标准曲线,对照标准曲线计算凝血酶与G-四链体结合的速率。

2.如权利要求1所述的一种毛细管电泳检测凝血酶与G‐四链体结合速率的方法,其特征在于:步骤(1)所述的荧光染料为6-FAM,5-FAM,TAMRA,ATTO-590中的一种。

3.如权利要求1所述的一种毛细管电泳检测凝血酶与G‐四链体结合速率的方法,其特征在于:步骤(1)所述的荧光染料中DNA序列为5’-AGT CCG TGG TAG GGC AGG TTA GGG TGA CT-3’。