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专利号: 2016100657296
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种Cronobacter sakazakii的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌缺失了ESA-03574基因片段;所述ESA-03574基因片段的核苷酸序列是SEQ ID NO:1的序列。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌为无抗性C.sakazakii BAA894ΔESA-03574,以Cronobacter sakazakii BAA894为出发菌、缺失了核苷酸序列为SEQ ID NO:1的ESA-03574基因片段。

3.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌的构建方法如下:

将人工构建的ESA-03574敲除片段电转化入含pKD46质粒的C.sakazakii BAA894,获得突变株C.sakazakii BAA894ΔESA-03574-loxPkan,再化转入pKD-Cre质粒,通过位点特异性重组敲除卡那霉素抗性基因;去除pKD-Cre质粒后获得无抗性lipid A的基因结构突变的基因工程菌。

4.根据权利要求3所述的基因工程菌,其特征在于,所述ESA-03574敲除片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

5.一种降低Cronobacter sakazakii对阳离子抗菌肽抗性的方法,其特征在于,所述方法是敲除Cronobacter sakazakii菌的ESA-03574基因片段;所述Cronobacter sakazakii菌株为BAA894;所述ESA-03574基因片段的核苷酸序列是SEQ ID NO:1的序列;且敲除了ESA-03574基因片段的Cronobacter sakazakii菌在pH5.0条件下作用。

6.一种降低Cronobacter sakazakii对HEK-Blue HEK-4细胞刺激作用的方法,其特征在于,所述方法是敲除Cronobacter sakazakii菌的ESA-03574基因片段;所述Cronobacter sakazakii菌株为BAA894;所述ESA-03574基因片段的核苷酸序列是SEQ ID NO:1的序列;且敲除了ESA-03574基因片段的Cronobacter sakazakii菌的菌浓度为105~106CFU/mL。

7.权利要求1-4任一所述基因工程菌在阳离子抗性肽及在疫苗佐剂上的应用。