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专利号: 2016100657421
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种Cronobacter sakazakii的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌缺失了ESA-02008基因片段。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述ESA-02008基因片段的核苷酸序列是SEQ ID NO:1的序列。

3.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌为无抗性C.sakazakii BAA894△ESA-02008,以Cronobacter sakazakii BAA894为出发菌、缺失了核苷酸序列为SEQ ID NO:1的ESA-02008基因片段。

4.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌的构建方法如下:

将人工构建的ESA-02008敲除片段电转含pKD46质粒的C.sakazakii BAA894,获得突变株C.sakazakii BAA894 ΔESA-02008-loxPkan,再化转入pKD-Cre质粒,通过位点特异性重组敲除卡那霉素抗性基因;去除pKD-Cre质粒后获得无抗性lipid A的基因结构突变的基因工程菌。

5.根据权利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,所述ESA-02008敲除片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

6.一种降低Cronobacter sakazakii对阳离子抗菌肽抗性和/或降低Cronobacter sakazakii细胞毒性和/或降低Cronobacter sakazakii菌株在巨噬细胞中的繁殖水平和/或提高细胞因子产量的方法,其特征在于,所述方法是敲除Cronobacter sakazakii菌的ESA-02008基因片段。

7.权利要求1-5任一所述基因工程菌在制备类脂A方面的应用。

8.权利要求1-5任一所述基因工程菌在制备疫苗或疫苗佐剂方面的应用。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用是对基因工程菌的类脂A进行提取,然后利用类脂A制备疫苗或疫苗佐剂。