1.一种含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,其特征在于,所述荧光探针为Rh-Gly荧光探针,其结构通式如(Ⅰ)所示:其中,
R1=R2=R3=R4=H;
或R1=R4=H,R2=-CH2CH3,R3=-CH3;
或R1=R2=-CH3,R3=R4=H;
或R1=R2=-CH2CH3,R3=R4=H;
或R1=R4=-(CH2)3-,R2=R3=-(CH2)3-。
2.如权利要求1所述的一种含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,其特征在于,所述的Rh-Gly荧光探针的制备方法包括如下步骤:(1)罗丹明甘氨酸甲酯的制备
称取罗丹明类化合物于圆底烧瓶中,加入1,2-二氯乙烷至完全覆盖烧瓶底部,加入三氯氧磷,加热反应3-5小时后,冷却至室温,加入氨基酸类化合物的乙腈溶液,再向圆底烧瓶中逐滴滴入三乙胺,室温搅拌12-24h得反应液A;将反应液A用二氯甲烷萃取,取下层液,加入无水硫酸镁干燥,过柱提纯,得到白色固体;
(2)罗丹明甘氨酸(Rh-Gly)的制备
将白色固体溶于甲醇和过量的氢氧化钠溶液中,加热回流5-8小时后得反应液B,反应液B蒸干后,经柱层析提纯得到Rh-Gly荧光探针。
3.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,其特征在于,罗丹明类化合物与三氯氧磷的摩尔比为1:(3-6);所用的氨基酸类化合物为甘氨酸甲酯。
4.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,其特征在于,所述罗丹明类化合物为罗丹明B,罗丹明6G,四甲基罗丹明TMR,罗丹明110或罗丹明101。
5.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,其特征在于,步骤
1)中采用80-100℃的油浴加热反应3-5小时。
6.一种如权利要求1所述的含甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针,能够准确测定溶液中的pH,其pKa为5.8,pH检测范围为4.0-8.0。
7.一种如权利要求1所述的含甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针可作为光控荧光开关在活细胞内光控荧光开与关的应用。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的活细胞为Hela细胞株、MCF-7细胞株或RAW264.7细胞株。