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专利号: 2016102166231
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于包括:

向DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入柠檬酸钠缓冲溶液、双氧水、3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和一系列不同浓度的标准半胱氨酸溶液或乙酰半胱氨酸溶液并混合反应,测定所获混合反应体系在可见光波段的吸光值,建立半胱氨酸或乙酰半胱氨酸浓度-吸光值标准曲线;

向DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入柠檬酸钠缓冲溶液、双氧水、3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和含有半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的待测样品并混合反应,测定所获混合反应体系在可见光波段的吸光值,并与所述标准曲线比对,从而测得待测样品中的半胱氨酸或乙酰半胱氨酸浓度。

2.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述DNA-Ag/Pt纳米团簇粒径在3.0nm~6.0nm。

3.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述DNA-Ag/Pt纳米团簇内Ag与Pt的质量比为1:10~1:30。

4.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液的浓度为0.1μM~2.0μM。

5.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述柠檬酸钠缓冲溶液的pH值为3.0~4.5。

6.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液的浓度为1.0mM~4.0mM。

7.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述双氧水的浓度为0.5M~2.0M。

8.根据权利要求1所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述混合反应是在温度20℃~45℃的条件下进行。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)提供10μL浓度为0.1μM~2.0μM的DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液;

(2)向步骤(1)所获的DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入30μLpH值为3.0~4.5的柠檬酸钠缓冲溶液、20μL浓度为0.5M~2.0M的双氧水和40μL浓度为1.0mM~4.0mM的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和100μL一系列不同浓度的标准半胱氨酸或乙酰半胱氨酸溶液,均匀混合,形成混合反应体系,充分反应后,分别测定所获的各混合反应体系在可见光波段的吸光值,由此建立半胱氨酸浓度-吸光值标准曲线;

(3)向步骤(1)所获的DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入30μLpH值为3.0~4.5的柠檬酸钠缓冲溶液、20μL浓度为0.5M~2.0M的双氧水和40μL浓度为1.0mM~4.0mM的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和100μL待测样品,均匀混合,形成混合反应体系,充分反应后,再测定该混合反应体系在可见光波段的吸光值,并与所述标准曲线对照,从而测得待测样品中的半胱氨酸或乙酰半胱氨酸浓度。

10.根据权利要求9所述的基于双金属纳米簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法,其特征在于,所述DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液的制备方法包括:将体积比为30:5:12的浓度为2.0μM的单链核酸溶液、浓度为150μM的硝酸银溶液和浓度为125μM的四氯铂酸钾溶液均匀混合后,4℃下避光反应30min,之后加入浓度为5.0mM的硼氢化钠溶液,所述单链核酸溶液与硼氢化钠溶液的体积比为30:4,37℃下振荡3h,得到浓度为2.0μM的DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液。