1.一种基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B的免疫检测方法，其特征在于：首先以对硝基苯硫酚4-NTP修饰15 nm金纳米粒子，用柠檬酸在金纳米粒子表面还原硝酸银形成9nm的银壳，从而得到内嵌拉曼信标4-NTP的金银核壳结构，其具有强拉曼信号的、区别于微孔板本底信号的金银核壳纳米粒子；金银核壳纳米粒子标记肠毒素B单克隆抗体，并应用于金黄色葡萄球菌肠毒素B的免疫检测；具体步骤为：（1）金银核壳纳米粒子的合成：采用柠檬酸还原法合成15nm金纳米粒子Au NP，通过金巯键与信标分子4-NTP进行偶联：取5mL合成的金纳米粒子8000rpm离心15min，用1mL 10mM 磷酸盐缓冲液PB重悬；加入25μL 200μM的对硝基苯硫酚4-NTP，室温避光反应6-8h；然后

8000rpm离心15 min，加入600μL超纯水和300μL质量体积比为10% 的聚乙烯吡咯烷酮；再加入120μL 2mM AgNO3和100μL 0.1M的柠檬酸三钠，迅速震荡后室温静置10 min；8500rpm离心15 min后，弃去上清，用1mL 10mM PB重悬合成金银核壳纳米粒子；

对金银核壳纳米粒子的银壳厚度、拉曼信号通过投射电镜和拉曼光谱仪进行表征；

（2）金银核壳纳米粒子标记肠毒素B单克隆抗体：

1mL步骤（1）制备的金银核壳纳米粒子中加入终浓度为10μg/mL的金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体1F6，加入8μL 0.2 M Na2CO3调节pH到7.5，室温震荡反应2h；向体系中加入50μL 20mg/mL的BSA，室温震荡反应2h；8500rpm离心15min后完成金银核壳纳米粒子的标记肠毒素B单克隆抗体；

（3）金黄色葡萄球菌肠毒素B免疫检测：

a、将终浓度为5μg/mL、0.01M碳酸盐缓冲液为溶剂的金黄色葡萄球菌肠毒素包被抗体K3加入到微孔板中，加入量为100μL/孔，37℃孵育2h；

b、用10mM PBS、0.1% Tween 20的洗液洗步骤a所得微孔板3次，每次间隔3min；加入封闭液，即质量浓度为0.2%明胶，溶剂为0.01M碳酸盐缓冲液，37℃孵育2h；

c、用10mM PBS、0.1% Tween 20的洗液洗步骤b所得微孔板3次，每次间隔3min；按100μL/孔加入金黄色葡萄球菌肠毒素B样品到微孔板中，37℃反应1h；

d、用10mM PBS、0.1% Tween 20的洗液洗步骤c所得微孔板3次，每次间隔3min；加入步骤（2）制备的金银核壳纳米粒子标记的金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体1F6，加入量为

100μL/孔，37℃反应1h；

e、用10mM PBS、0.1%Tween 20的洗液洗步骤d所得微孔板4次，每次间隔3min；最后一次洗板后用吸水纸排干微孔板，然后用拉曼光谱仪扫描样品信号，得到检测结果。

2.根据权利要求1所述基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B的免疫检测方法，其特征在于：步骤（1）中所述聚乙烯吡咯烷酮、AgNO3和柠檬酸三钠，步骤（2）中所述Na2CO3和BSA的溶剂均为超纯水。

3.根据权利要求1所述基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B的免疫检测方法，其特征在于：步骤（3）c中所述金黄色葡萄球菌肠毒素B样品的标准品浓度为

100 pg/mL、50 pg/mL、20 pg/mL、10 pg/mL、5 pg/mL、2 pg/mL及0 pg/mL。

4.根据权利要求1所述基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B的免疫检测方法，其特征在于步骤（3）e的检测结果如下：若酶标微孔板上有拉曼信号检出，并被判定为阳性，SEB浓度≥0.002ng/mL；若酶标微孔板上没有拉曼信号检出，判定为阴性，则样品中SEB浓度＜0.002ng/mL。