1.一种直链糊精基脂质体的制备方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)端基乙胺化的直链糊精的制备:将乙二胺溶于二甲亚砜溶液中,得到体积浓度为
0.2%-0.5%的乙二胺/DMSO溶液;加入按质量浓度计为2%-5%的直链糊精,混合均匀后置于
50-60℃恒温水浴中通氮气搅拌反应48-72h,反应过程中每隔6h加入10-20mg硼氢化钠;待反应结束后用甲醇进行洗涤,过滤、干燥,获得端基乙胺化的直链糊精;
(2)两亲性直链糊精的制备:将步骤(1)获得的端基乙胺化的直链糊精作为大分子引发剂溶解于schlenk管中的无水DMSO溶液中,加入单体γ-苄基-L-谷氨酸NCA,使引发剂与单体的摩尔比为1:20-50,在25℃条件下聚合60-72h后倒入甲醇中终止反应,并用甲醇洗涤3次、过滤、35℃真空干燥48h获得两亲性直链糊精;
(3)直链糊精基脂质体的制备:将步骤(2)所得的两亲性直链糊精溶于二甲亚砜溶液中,使其浓度为8-10mg/mL,待完全溶解后加入超纯水使所获溶液中两亲性直链糊精的浓度为1-2mg/mL,200rpm搅拌20 min后用3500Da的透析袋透析,得到粒径为100-250nm的直链糊精基脂质体溶液。
2.根据权利要求1所述直链糊精基脂质体的制备方法,其特征在于步骤为:采用乙二胺通过还原胺化反应对聚合度DP为30-35、分散系数为1.12-1.25的直链糊精进行端基氨基化修饰;之后通过该氨基化修饰的两亲性直链糊精引发γ-苄基-L-谷氨酸NCA的开环聚合反应,形成以直链糊精为亲水段、聚苄基谷氨酸为疏水段的两嵌段聚合物;然后通过纳米沉淀法制备得到所述直链糊精基脂质体。
3.根据权利要求2所述直链糊精基脂质体的制备方法,其特征在于所述直链糊精的制备过程为:将蜡质玉米淀粉分散于pH 5.0-6.0的0.05 mol/L的醋酸钠缓冲液中,使淀粉与缓冲液的质量/体积比为1%-5%,100℃糊化30min后置于高压灭菌锅中135℃高压糊化
30min,待溶液冷却至50-60℃;加10-50 U/g普鲁兰酶进行脱支反应8-12h,沸水浴灭酶15 min,5000 rpm离心10 min得到上清液;量取与上清液相同体积的乙醇溶液,通过恒流泵以
0.5 mL/min的速度将其逐渐添加到上清液中,搅拌8h 后4℃静置12h,8000 rpm 离心15 min后取上清液,继续以0.5mL/min的速度添加与上述相同体积的乙醇溶液,搅拌8h 后4℃静置12h,8000rpm 离心15min,沉淀于40℃烘箱干燥过夜获得聚合度为30-35,分散系数为
1.12-1.25的直链糊精。
4.根据权利要求1所述直链糊精基脂质体的制备方法,其特征在于:步骤(2)所开环聚合获得的两亲性直链糊精聚γ-苄基-L-谷氨酸的分子量在5000-6000 Da之间。
5.用权利要求1所述方法制备的直链糊精基脂质体,其特征在于:所述两亲性直链糊精基脂质体为通过纳米沉淀法制备得到的,粒径在100 -250nm之间、双层膜厚度为7-10 nm的直链糊精基脂质体。