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专利号: 2016103983545
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种生产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的方法,其特征在于,所述方法是以表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌作为生产菌株,在利用生产菌株发酵生产酸性脲酶的过程中添加Fe3+;

所述枯草芽孢杆菌表达的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;

所述表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌的构建方法如下:

1)从地衣芽孢杆菌基因组上克隆获得核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶基因簇ureBL,将ureBL通过Kpn I及Xho I克隆到序列如SEQ ID NO.7所示的质粒pTTB,得到重组质粒pTTB-ureBL;

2)将构建的重组质粒pTTB-ureBL转化于Bacillus subtilis 168构建产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL),Fe3+依赖型食品级酸性脲酶在重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL)中表达受P43组成型启动子调控;

所述在利用生产菌株发酵生产酸性脲酶的过程中添加的Fe3+的浓度为2mmol/L。