1.一种生产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的方法,其特征在于,所述方法是以表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌作为生产菌株,在利用生产菌株发酵生产酸性脲酶的过程中添加Fe3+;
所述枯草芽孢杆菌表达的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
所述表达Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的枯草芽孢杆菌的构建方法如下:
1)从地衣芽孢杆菌基因组上克隆获得核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Fe3+依赖型食品级酸性脲酶基因簇ureBL,将ureBL通过Kpn I及Xho I克隆到序列如SEQ ID NO.7所示的质粒pTTB,得到重组质粒pTTB-ureBL;
2)将构建的重组质粒pTTB-ureBL转化于Bacillus subtilis 168构建产Fe3+依赖型食品级酸性脲酶的重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL),Fe3+依赖型食品级酸性脲酶在重组Bacillus subtilis168(pTTB-ureBL)中表达受P43组成型启动子调控;
所述在利用生产菌株发酵生产酸性脲酶的过程中添加的Fe3+的浓度为2mmol/L。