欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2016104149546
申请人: 西南交通大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种基于磁响应Pickering乳液的厌氧菌发酵培养方法,其特征在于,以厌氧菌菌液为水相,正辛烷或白油为油相,烷基硅烷改性的Fe3O4纳米颗粒稳定剂,成乳形成磁响应Pickering乳液;该Pickering乳液制备条件如下:将烷基硅烷改性Fe3O4纳米颗粒稳定剂,加入到正辛烷或白油中,超声分散2分钟,配制成质量百分比为1-3wt%的纳米颗粒-正辛烷或白油分散液;将此分散液加入到按常规方法培养制得的菌液中;匀浆机在5000-13000rpm转速下乳化1分钟,所得包裹有菌液的乳液在恒定温度下用作厌氧发酵培养;在本步骤中菌液:正辛烷或白油=8:5~8:11质量比; 将该Pickering乳液作为微型生物反应体系实现对厌氧菌的培养,发酵结束后,通过磁铁的吸引使得Pickering乳液由油水界面层进入水相发生破乳;借助磁响应将破乳后的Fe3O4纳米颗粒进行回收;利用重力作用对油水两相分离操作,得到发酵培养后的菌液和微生物代谢产物;通过磁响应对包裹有菌体的乳液进行定向转移,在培养过程中,通过油包水乳液提供绝对厌氧环境,借助外界磁场引导Fe3O4纳米颗粒稳定的Pickering乳液厌氧菌培养体系定向移动到不同物理环境中进行发酵培养、迁移集中、分离挑选和富集。

2.根据权利要求1所述的基于磁响应Pickering乳液的厌氧菌发酵培养方法,所述Fe3O4纳米颗粒稳定剂按照下述步骤制得:

1)以体积比1:1比例配制乙醇/水溶液,适量粒径20-30nm的Fe3O4纳米颗粒加入到乙醇/水溶液中,确保乙醇/水溶液完全浸没Fe3O4纳米颗粒,在25℃、40KHz下超声分散20分钟;用外部磁场将超声分散的Fe3O4纳米颗粒沉降至底部,移出上清液;向沉淀中加入适量上述乙醇/水溶液,超声处理后磁铁辅助沉降,重复上述洗涤操作3次;

2)洗涤完成后,向Fe3O4纳米颗粒沉淀中加入无水乙醇,电动搅拌分散30分钟,转速350-

400rpm,再依次向搅拌状态下的分散液中加入烷基三氯硅烷和水,电动搅拌12小时,转速

350-400rpm,在本步骤中Fe3O4纳米颗粒沉淀:无水乙醇:烷基三氯硅烷:水=1:24:1~2:30质量比;

3)待反应结束后,磁铁辅助沉降Fe3O4纳米颗粒,移出上清液,用无水乙醇对改性后的Fe3O4纳米颗粒进行3次洗涤;

4)将上述Fe3O4纳米颗粒在50℃条件下恒温烘干,即制得Fe3O4纳米颗粒稳定剂。

3.根据权利要求1所述的基于磁响应Pickering乳液的厌氧菌发酵培养方法,所述Fe3O4纳米颗粒稳定剂与厌氧菌液的破乳分离过程包括:

1)外部磁场沿容器壁向下移动,Pickering乳液在磁驱动下由油水界面转移进入水相并发生乳液破裂,多次上下移动磁铁操作,直到体系中不再存在乳液;

2)在外部磁场的吸引下,将破乳后的Fe3O4纳米颗粒进行回收;3)利用重力作用进行油水两相分离操作,得到发酵培养后的菌液和微生物代谢目标产物。