1.一种牡丹灌根用复合微生物菌肥的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、取热带假丝酵母进行活化,培养至对数生长期,得到含热带假丝酵母的混合物A;按质量比1:1:3取红薯渣、苹果鲜渣和苹果落果,粉碎至0.8cm以下,以红薯渣、苹果鲜渣和苹果落果总质量为基准,加入1%的尿素,搅拌均匀得到混合物B;将混合物A接种到混合物B中,接种量为混合物B质量的1%,室温搅拌发酵4-5天,制得发酵物Ⅰ;
步骤二、按质量比1:1:2:3取鸡粪、牛粪、沼气池渣和粉碎至1cm以下的小麦秸秆,混合均匀得到混合物C,以混合物C的质量为基准,加入5%的生石灰,暴露于空气中,自然放置3-5天,制得发酵物Ⅱ;
步骤三、将步骤二制得的发酵物Ⅱ加入到步骤一制得的发酵物Ⅰ中,其中发酵物Ⅱ与发酵物Ⅰ质量比为3:1,混匀后得到混合物D;在混合物D中接种处于对数生长期的白地霉、巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌,且各菌株的接种量均为混合物D 质量的1%,于30℃条件下搅拌发酵4-6天,制得发酵物Ⅲ;
步骤四、以苜蓿为宿主植物,在扩繁基质中扩繁根内球囊霉,扩繁基质由河沙和土按质量比1:1混合后灭菌制得,根内球囊霉接种量为3%-5%,当根内球囊霉孢子达到每克土中含
30个以上时,打碎苜蓿根和扩繁基质,获得含有根内球囊霉菌根真菌孢子、根内外菌丝和侵染根段的混合物E1;以苜蓿为宿主植物,在扩繁基质中扩繁摩西球囊霉,扩繁基质由河沙和土按质量比1:1混合后灭菌制得,摩西球囊霉接种量为3%-5%,当摩西球囊霉孢子达到每克土中含30个以上时,打碎苜蓿根和扩繁基质,获得含有摩西球囊霉菌根真菌孢子、根内外菌丝和侵染根段的混合物E2;将混合物E1和混合物E2按质量比1:1混合均匀获得混合物E;
步骤五、按质量比100:90:2:1取发酵物Ⅲ、混合物E、鱼粉和硫酸锌,将混合物E、鱼粉和硫酸锌加入到发酵物Ⅲ中,混匀后制得半固体状的混合物F;
步骤六、取枯草芽孢杆菌HS5B5,在种子培养基中活化,活化后转入发酵培养基中发酵,当枯草芽孢杆菌HS5B5生长至稳定期时,得到含有枯草芽孢杆菌HS5B5的混合物G;
步骤七、将步骤五制得的混合物F与步骤六制得的混合物G按质量比3-5:1混合,搅拌均匀即制得牡丹灌根用复合微生物菌肥。
2.根据权利要求1所述的一种牡丹灌根用复合微生物菌肥的制备方法,其特征在于:步骤六所述的种子培养基为营养肉汤培养基。
3.根据权利要求2所述的一种牡丹灌根用复合微生物菌肥的制备方法,其特征在于:步骤六所述的枯草芽孢杆菌HS5B5的活化温度为30℃,活化时长为11小时。
4.根据权利要求1所述的一种牡丹灌根用复合微生物菌肥的制备方法,其特征在于:步骤六所述的发酵培养基以每加入1000ml水为参照,其组分及其添加量分别为:玉米粉
15.0g,葡萄糖3.0g,大豆粉15.0g,蛋白胨3.0g, MgSO4·7H2O 0.5g,KH2PO4·2H2O 1.0g,水
1000ml,调节pH至7.0。
5.根据权利要求4所述的一种牡丹灌根用复合微生物菌肥的制备方法,其特征在于:步骤六所述的枯草芽孢杆菌HS5B5在发酵培养基中发酵的条件为:30℃通气发酵25小时。