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专利号: 2016105302971
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种传染性法氏囊病病毒DNA疫苗,其特征在于,所述DNA疫苗为包含IBDV VP2基因、鸡Akirin2基因和鸡GM-CSF基因的三基因共表达载体;

所述IBDV VP2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;

所述鸡Akirin2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;

所述鸡GM-CSF基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.根据权利要求1所述的传染性法氏囊病病毒DNA疫苗,其特征在于,在所述三基因共表达载体中,所述IBDV VP2基因、鸡Akirin2基因和鸡GM-CSF基因串联形成VP2-Akirin2-GM-CSF序列;每相邻两个基因之间由linker片段进行连接。

3.根据权利要求2所述的传染性法氏囊病病毒DNA疫苗,其特征在于,所述linker片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

4.根据权利要求3所述的传染性法氏囊病病毒DNA疫苗,其特征在于,所述VP2-Akirin2-GM-CSF序列所插入的载体为pTriEx-4表达载体。

5.权利要求4所述的传染性法氏囊病病毒DNA疫苗的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)、合成所述VP2-Akirin2-GM-CSF序列并将其连接到克隆载体上得到克隆载体重组质粒;

2)、将所述VP2-Akirin2-GM-CSF序列从所述克隆载体重组质粒上酶切下来,连接到经过相同酶切的表达载体pTriEx-4上,构建获得的新的重组质粒即为所述传染性法氏囊病病毒DNA疫苗。

6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述克隆载体为pUC57。

7.用于扩增权利要求1~4任一项所述的IBDV VP2基因、鸡Akirin2基因和鸡GM-CSF基因的引物对,其特征在于,所述IBDV VP2基因的上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;

所述鸡Akirin2基因的上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示;

所述鸡GM-CSF基因的上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示。

8.用于扩增权利要求2~4任一项所述的VP2-Akirin2-GM-CSF序列的引物对,其特征在于,其上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:10所示。

9.含有权利要求1~4任一项所述的传染性法氏囊病病毒DNA疫苗的制剂。

10.根据权利要求9所述的制剂,其特征在于,所述制剂的剂型为液体制剂,将所述DNA疫苗溶于PBS溶液中即得。