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专利号: 2016105616466
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于鉴定天台蛙(Glandirana tientaiensis)的物种特异性PCR鉴定引物,其特征在于,所述物种特异性PCR鉴定引物包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的引物对。

2.一种利用物种特异性PCR鉴定天台蛙(Glandirana tientaiensis)的方法,其特征在于,所述方法包括:

1)提取待测样品的总DNA;

2)采用根据权利要求1所述的物种特异性PCR鉴定引物对步骤1)中提取的总DNA进行PCR扩增;

3)将步骤2)中得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测;其中,在步骤3)中所得到的琼脂糖凝胶电泳图中,若含有步骤2)中得到的产物的泳道中出现阳性扩增条带,则判断所述待测样品为来自天台蛙的样品,若含有步骤2)中得到的产物的泳道中不出现阳性扩增条带,则判断所述待测样品不是来自天台蛙的样品。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,出现的条带中所含有的DNA片段的长度为230bp。

4.根据权利要求2所述的方法,其中,相对于30μL的PCR扩增体系的总体积,每条引物的浓度为0.2-0.5pmol/L,DNA模板的用量为40-60ng。

5.根据权利要求2-4中任意一项所述的方法,其中,所述PCR扩增过程的变性温度为92-

98℃,变性时间为35-45s。

6.根据权利要求2-4中任意一项所述的方法,其中,所述PCR扩增过程的退火温度为55-

60℃,退火时间为25-45s。

7.一种根据权利要求1所述的物种特异性PCR鉴定引物或权利要求2-6任意一项所述的方法在鉴定天台蛙(Glandirana tientaiensis)中的应用。