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专利号: 2016105658632
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:

(1)大豆凝集素水提液制备:将大豆磨成大豆粉,过40-100目筛,溶于蒸馏水中,10-60℃下超声辅助浸提5-60min,浸提后经8000-15000rpm、4℃离心10-20min,取上清液即为大豆凝集素水提液,所述蒸馏水与大豆粉的体积比为5-50:1;

(2)反胶束溶液配制:将表面活性剂和助溶剂甘油加入到有机溶剂中,搅拌至表面活性剂完全溶解,再加入水,使体系Wo值=15-35,表面活性剂浓度为200-300mM,静置所得透明溶液即为反胶束溶液,所述助溶剂甘油的添加量为反胶束溶液总量的1.6-10%,所述Wo表示反胶束溶液中水与表面活性剂的摩尔浓度比值,Wo≈[H2O]/[表面活性剂],所述有机溶剂选自戊烷、环己烷、正己烷、辛烷、异辛烷、己醇和丁醇中的至少一种,所述表面活性剂为结构修饰过的松树皮提取物,具体制备方法如下:将松树皮提取物溶于丙酮中,于-10℃下加入吡啶,再缓慢滴加脂肪酰氯,反应1-8h后加水稀释反应液,分出有机相,剩余水相用乙酸乙酯萃取后,合并所得有机相,得到酯化接枝松树皮提取物溶液;依次用1mol/L HCl、饱和Na2CO3溶液、饱和NaCl溶液洗涤,真空干燥得到表面活性剂,所述HCl、饱和Na2CO3溶液和饱和NaCl溶液的体积用量均为酯化接枝松树皮提取物溶液体积的1-4倍;

(3)前萃取过程:调节步骤(1)所得大豆凝集素水提液pH值为4.0-6.0,离子强度为20-

200mM,将其与反胶束溶液按照体积比为1:1-50的比例混合5-40min后,1500-5000rpm离心分层,取上层有机相;

(4)反萃取过程:将步骤(3)所得上层有机相与丙酮、蒸馏水混合5-40min后,1500-

5000rpm离心分层,取下层水相,经冷冻干燥,得到分离纯化后的大豆凝集素,所述步骤(3)所得上层有机相与丙酮、蒸馏水的体积比为1:1-5:1-5。

2.根据权利要求1所述的反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,步骤(1)中所述大豆选自黄豆、青豆和黑豆中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,步骤(2)中所述有机溶剂为异辛烷。

4.根据权利要求1所述的反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,所述松树皮提取物含有95%的原花青素低聚物。

5.根据权利要求1所述的反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,所述脂肪酰氯选自己酰氯、辛酰氯、月桂酰氯、肉豆蔻酰氯、油酸酰氯和硬脂酸酰氯中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的反胶束分离纯化大豆凝集素的方法,其特征在于,所述松树皮提取物、丙酮、脂肪酰氯和乙酸乙酯的质量之比为1:1-4:0.8-2.6:1-4,松树皮提取物的质量与吡啶的质量之比为1:0.5-1.6。