1.一种靶向载药纳米级超声微泡,其特征在于,所述靶向载药纳米级超声微泡包括:微泡膜壁、FA-CNTs-PTX靶向载药复合物、以及包裹在微泡膜壁内部的惰性气体;其中所述FA为叶酸,CNTs为碳纳米管,PTX为紫杉醇;
其中碳纳米管置于微泡膜壁内部,靶向因子叶酸的一端通过壳聚糖连接到碳纳米管上,另一端穿过微泡膜壁伸向微泡膜壁外侧,连接叶酸的碳纳米管通过物理吸附负载抗肿瘤药物紫杉醇;
所述微泡膜壁为脂质双分子层结构,微泡膜壁材料为Span60和PEG1500;
所述靶向载药纳米级超声微泡的粒径在400~600nm。
2.一种靶向载药纳米级超声微泡的制备方法,其特征在于,所述靶向载药纳米级超声微泡的制备方法包括以下步骤:步骤一:制备叶酸-壳聚糖偶合物;
步骤二:将碳纳米管进行羧基化,得到羧基化修饰的碳纳米管;
步骤三:制备靶向复合物FA-CS-CNTs;所述CS为壳聚糖;
步骤四:制备靶向载药复合物FA-CNTs-PTX;所述PTX为紫杉醇;
步骤五:制备复合FA-CNTs-PTX的微泡,即靶向载药纳米级超声微泡;
所述步骤一中制备叶酸-壳聚糖偶合物的具体过程为:
将壳聚糖溶于1%的醋酸溶液中,搅拌至壳聚糖完全溶解;另称取叶酸和EDC溶于二甲基亚砜中,避光搅拌至叶酸完全溶解;将叶酸溶液逐滴加入CS醋酸溶液中,避光反应4~6小时,加入丙酮溶液,直至反应产物完全沉淀后,将沉淀物离心,用二甲基亚砜洗涤,再用双蒸水洗涤,收集所得下层物,冷冻干燥,得到叶酸-壳聚糖偶合物;
所述步骤二中得到羧基化修饰的碳纳米管的具体过程为:
取碳纳米管加入到圆底烧瓶中,向其中加入浓硫酸和浓硝酸体积比为3:1的混酸,95~
120℃条件下加热回流2~4小时,冷却后,将所得反应溶液用0.45μm混合纤维微孔滤膜抽滤,用双蒸水洗涤至中性,收集固体产物,冷冻干燥,得到羧基化修饰的碳纳米管;
所述步骤三中制备靶向复合物FA-CS-CNTs的具体过程为:
称取等质量的羧基化碳纳米管和叶酸-壳聚糖偶合物,分别置于1%醋酸溶液中,醋酸溶液与羧基化碳纳米管或叶酸-壳聚糖偶合物的用量比为2~3ml/mg,超声分散0.5~1小时,得到羧基化碳纳米管分散液和叶酸-壳聚糖偶合物溶液,在搅拌条件下,将叶酸-壳聚糖偶合物溶液加到羧基化碳纳米管分散液中,避光反应16~24小时;反应结束后,混合物进行抽滤,并用1%醋酸溶液洗涤,再用双蒸水洗涤至中性,收集固体产物并冷冻干燥,产物标记为FA-CS-CNTs;
所述步骤四中制备靶向载药复合物FA-CNTs-PTX的具体过程为:
称取等质量的靶向复合物FA-CS-CNTs与紫杉醇,分别加到无水乙醇中,无水乙醇与靶向复合物FA-CS-CNTs或紫杉醇的用量比为1~2ml/mg,再将紫杉醇的乙醇溶液滴加到靶向复合物FA-CS-CNTs的乙醇分散液中,避光,磁力搅拌3~5小时,得到靶向载药复合物,产物标记为FA-CNTs-PTX;
所述步骤五中制备复合FA-CNTs-PTX的微泡的具体过程为:
取质量比为1:1:2的Span60、PEG1500和NaCl,研磨混合均匀后,加入PBS后,加热并磁力搅拌至混合均匀;再将靶向载药复合物FA-CNTs-PTX分散于PBS中;混合两个PBS体系,70~
80℃下磁力搅拌30~60分钟,制得膜材;将制得膜材在850~900W条件下进行探头超声,同时通入氮气,得到复合微泡粗品;再将微泡粗品在3000~5000rpm下离心10~15分钟,收集上层液体,与等体积的PBS一起置于分液漏斗中,静置30~60分钟,洗涤后收集中层液体,得到复合FA-CNTs-PTX的微泡;所述膜材包括微泡膜壁和FA-CNTs-PTX靶向载药复合物。