1.一种基于碳点荧光“猝灭-恢复”的碱性磷酸酶测定方法,其特征在于:
a、碳点的制备:将一定量的抗坏血酸或牛奶作为碳源与超纯水混合,这其中抗坏血酸的浓度为0.01–0.15 g/mL,牛奶与超纯水的体积比为1:1–1.25:1,搅拌形成均匀的溶液后转移至反应釜中,在180 ℃下加热一段时间,冷却后用二氯甲烷进行萃取或用微孔过滤器过滤得到的溶液用超纯水透析24 h作为荧光探针;
b、碱性磷酸酶的测定:50 μL 0.1 mol/L的选自抗坏血酸磷酸三钠盐或对氨基苯磷酸钠盐的碱性磷酸酶底物溶液和50 μL不同浓度的碱性磷酸酶溶液加入到400 μL pH=8.5的Tris-HCl缓冲液中,混合并反应25分钟后加入100 μL含有10 μM高锰酸钾和0.35 mg/L碳点的混合液;继续反应2 min后测定体系的荧光强度。
2.根据权利要求1所述的一种基于碳点荧光“猝灭-恢复”的碱性磷酸酶测定方法,其特征在于所述碳点的制备时,混合液在反应釜中加热的时间为2–4 h。