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专利号: 2016107498680
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种γ-谷氨酸转移酶荧光探针,其特征在于所述荧光探针为下列之一:

2.一种权利要求1所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针的制备方法,其特征在于所述方法为:将N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯溶于二氯甲烷中,依次加入1-羟基苯并三唑、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、三乙胺和式(Ⅱ)所示化合物,室温下反应12小时,将反应液分离纯化,获得所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针;

所述式(Ⅱ)所示化合物为下列之一:

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于式(Ⅱ)所示化合物与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为0.25-0.3:1,所述二氯甲烷体积用量以式(Ⅱ)所示化合物物质的量计为35-40mL/mmol;所述1-羟基苯并三唑与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比为0.6:1,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为0.6:1,三乙胺与N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸-1-叔丁酯物质的量之比均为1:1。

4.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述反应液分离纯化方法为:反应结束后,将反应液减压浓缩至无液体流出,获得浓缩液,将浓缩液以体积比15:1的二氯甲烷和甲醇混合液为展开剂进行薄层层析分离,收集Rf值为0.5的目标产物;再将目标产物加入无水二氯甲烷a中,静置澄清后加入三氟乙酸,室温搅拌反应4h,TLC追踪,完全反应后,旋蒸除尽溶剂和三氟乙酸至无液体流出,加无水二氯甲烷b重复旋蒸几次,随后加入甲醇溶解,滴入乙醚中,析出固体,过滤,滤饼烘干,获得γ-谷氨酸转移酶荧光探针;所述无水二氯甲烷a体积用量以目标产物质量计为0.16ml/mg,所述三氟乙酸体积用量以目标产物质量计为0.08ml/mg。

5.一种权利要求1所述γ-谷氨酸转移酶荧光探针在检测γ-谷氨酸转移酶中的应用。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述γ-谷氨酸转移酶为0~1000U/Lγ-谷氨酸转移酶缓冲溶液。