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专利号: 201610826733X
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种火龙果肉质茎段的总蛋白质提取方法,其特征在于,将火龙果肉质茎段粉碎后加入蛋白裂解剂,进行第一次冰上裂解40~60min,然后进行间歇超声波破碎,一次离心分层,向上层粘液中再次加入蛋白裂解剂,进行第二次冰上裂解10~30min,二次离心分层,得到上层清液,加入预冷后的丙酮,于-20℃沉淀过夜,三次离心分层,得到含胶状粘稠物的蛋白沉淀,再次加入预冷后的丙酮,轻摇震荡,四次离心分层,得到蛋白沉淀,自然状态下晾干,加入蛋白裂解剂,用质粒提取吸附柱过滤,五次离心分层,下层即得总蛋白质;

所述的蛋白裂解剂为添加有蛋白质抑制剂的蛋白裂解液,添加量为每mL蛋白裂解液中添加10μL蛋白质抑制剂;

其中,预冷后的丙酮中添加有0.1倍体积的离子液体,离子液体经过预处理:向[EMIM]+[BF4]-中送入高压CO2,置于60℃、3MPa的环境中保持1h,然后抽真空,并将[EMIM]+[BF4]-转移至于-4℃环境中冷冻;

粉碎后的火龙果肉质茎段在加入蛋白裂解剂前,经过预处理:将粉碎后的火龙果肉质茎段浸入质量分数为20%的盐水,进行电击处理,电击时间15s,电击电压为220V、脉冲频率为500MHz,静置30min。

2.如权利要求1所述的火龙果肉质茎段的总蛋白质提取方法,其特征在于,火龙果肉质茎段粉碎是通过向火龙果肉质茎段中加入聚乙烯吡咯烷酮,液氮研磨至粉末状得到。

3.如权利要求1所述的火龙果肉质茎段的总蛋白质提取方法,其特征在于,第一次冰上裂解的蛋白裂解剂添加量为每克火龙果肉质茎段中添加3~5mL蛋白裂解剂,第二次冰上裂解的蛋白裂解剂添加量为每克火龙果肉质茎段中添加2~3mL蛋白裂解剂。

4.如权利要求1所述的火龙果肉质茎段的总蛋白质提取方法,其特征在于,一次离心、二次离心的条件为温度低于4℃、转速5000rpm/min处理15min,三次离心、四次离心的条件为转速5000rpm/min处理15min,五次离心的条件为4000rpm/min离心3~5min。

5.如权利要求1所述的火龙果肉质茎段的总蛋白质提取方法,其特征在于,预冷后的丙酮的添加量为3倍体积。