1.一种荧光探针,其具有如下式(I)所示的结构,
2.一种权利要求1所述的荧光探针的制备方法,包含以下步骤:在催化剂存在的条件下,式(II)所示的化合物与式(III)所示的化合物反应,得到式(I)所示化合物所述催化剂选自有机碱或无机碱;其中,所述有机碱选自三乙胺、吡啶中的至少一种;
所述无机碱选自碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸氢钠中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,式(II)所示的化合物、式(III)所示的化合物和催化剂的投料摩尔比为1:0.5~5:0.5~5;
所述反应的反应温度为0℃~60℃;
所述反应在合适的有机溶剂中进行,所述合适的有机溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙腈中的至少一种。
4.一种含有权利要求1所述的荧光探针的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含试剂储备液a和试剂储备液b;所述试剂储备液a为磷酸盐缓冲液,所述试剂储备液b为式(I)所示荧光探针的溶液。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂储备液a中的磷酸盐选自Na2HPO4、NaH2PO4和KH2PO4中的至少一种,所述磷酸盐的摩尔浓度为10~500mM;所述试剂储备液b中式(I)荧光探针的浓度为1~10mM。
6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液的pH值为6~9。
7.权利要求4~6任一项所述的试剂盒通过酶抑制法测定样品中的羧酸酯酶的浓度和/或检测样品中的农药残留的用途。
8.一种使用权利要求4~6任一项所述的试剂盒检测羧酸酯酶浓度的方法,其包含以下步骤:(1)制备标准曲线
以630~690nm作为激发波长,测定一系列不同浓度的羧酸酯酶标准品溶液在发射波长
650~750nm处的荧光强度记为F,并测定溶剂空白在发射波长为650~750nm处的荧光强度记为F0,以羧酸酯酶的浓度C(U/mL)为横坐标,荧光强度变化值ΔF为纵坐标绘制标准曲线,其中,ΔF=F-F0;
(2)检测样品中羧酸酯酶的浓度
将步骤(1)所述羧酸酯酶标准品溶液替换为待测样品溶液,按照步骤(1)所述方法检测待测样品在与步骤(1)相同的发射波长处的荧光强度,记为F’,将所述F’代入步骤(1)所得标准曲线,进而得到待测样品中羧酸酯酶的浓度。
9.一种使用权利要求4~6任一项所述的试剂盒检测农药残留的方法,包括如下步骤:(i)测定对照样品荧光强度或荧光成像
以630~690nm作为激发波长,向不含农药的对照样品的溶液中加入一定浓度的试剂储备液b,在发射波长为650~750nm处测定体系的荧光强度,或者是用激光共聚焦进行荧光成像;
(ii)测定待测样品荧光强度或荧光成像
向待测样品中加入与步骤(i)相同浓度的试剂储备液b,测定体系在与步骤(i)相同的发射波长处的荧光强度,或者是用激光共聚焦进行荧光成像,并与步骤(i)荧光强度或荧光成像对比。