1.一种利用双环氧化物水解酶制备(R)-苯乙二醇的方法,其特征在于,以外消旋环氧苯乙烷(rac-SO)为底物,所述双环氧化物水解酶是指环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3;所述环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述环氧化物水解酶VrEH3的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法是向缓冲体系添加终浓度为20~
200mM的rac-SO作为底物,然后将环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3同时加入,于10℃~30℃对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷。
A250I
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述环氧化物水解酶突变体AuEH2是以重组表达该环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I的重组细胞的形式添加到缓冲体系中。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述环氧化物水解酶VrEH3是以重组表达该环氧化物水解酶VrEH3的重组细胞的形式添加到缓冲体系中。
A250I
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将重组大肠杆菌E.coli/(AuEH2 )制成菌浓度为100mg/mL的、酶比活力为78mU/mg湿菌体的菌悬液,然后用于催化反应。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,将重组大肠杆菌E.coli/VrEH3制成菌浓度为100mg/mL的、酶比活力为6mU/mg湿菌体的菌悬液,然后用于催化反应。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I与环氧化物水解酶VrEH3的用量参照两酶活力比39:(24~42)。
8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述缓冲体系是100mmol/L、pH 7.0的磷酸盐缓冲液。
9.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,底物的初始反应浓度为50mM。
10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I与环氧化物水解酶VrEH3的用量参照两酶活力比39:42,反应温度为25℃。