欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2016109266495
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种利用双环氧化物水解酶制备(R)-苯乙二醇的方法,其特征在于,以外消旋环氧苯乙烷(rac-SO)为底物,所述双环氧化物水解酶是指环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3;所述环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述环氧化物水解酶VrEH3的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法是向缓冲体系添加终浓度为20~

200mM的rac-SO作为底物,然后将环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3同时加入,于10℃~30℃对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷。

A250I

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述环氧化物水解酶突变体AuEH2是以重组表达该环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I的重组细胞的形式添加到缓冲体系中。

4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述环氧化物水解酶VrEH3是以重组表达该环氧化物水解酶VrEH3的重组细胞的形式添加到缓冲体系中。

A250I

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将重组大肠杆菌E.coli/(AuEH2 )制成菌浓度为100mg/mL的、酶比活力为78mU/mg湿菌体的菌悬液,然后用于催化反应。

6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,将重组大肠杆菌E.coli/VrEH3制成菌浓度为100mg/mL的、酶比活力为6mU/mg湿菌体的菌悬液,然后用于催化反应。

7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I与环氧化物水解酶VrEH3的用量参照两酶活力比39:(24~42)。

8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述缓冲体系是100mmol/L、pH 7.0的磷酸盐缓冲液。

9.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,底物的初始反应浓度为50mM。

10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I与环氧化物水解酶VrEH3的用量参照两酶活力比39:42,反应温度为25℃。