1.一种线粒体靶向pH比率型荧光探针制备方法和应用，其特征在于,所述的比率型荧光探针的结构式为如(1)所示。

2.如权利要求1所述的比率型荧光探针的制备方法,其特征在于,其合成包括以下步骤：步骤1.合成2-(苯并[d]噻唑-2-基)-6-甲基苯酚

a. 在圆底烧瓶中加入2-羟基-3-甲基苯甲酸、邻氨基苯硫酚和多聚磷酸，在搅拌条件下120℃反应4-6小时，然后150℃反应6-8小时；

b.待步骤a中反应液冷却至室温后，将反应液倒入冰水中，再用饱和碳酸氢钠中和过量的多聚磷酸，过滤、水洗、干燥得目标化合物；

步骤2.合成3-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-羟基-5-甲基苯甲醛①.在圆底烧瓶中加入乌洛托品、2-(苯并[d]噻唑-2-基)-6-甲基苯酚和乙酸或三氟乙酸，加热回流24-36小时；

②. 反应完成后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤旋干溶剂得粗品，通过硅胶柱分离提纯得黄色固体目标化合物；

步骤3.合成(E)-4-(3-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-羟基-5-甲基苯乙烯基)-1-甲基吡啶-

1-鎓碘化物

Ⅰ.在圆底烧瓶中，加入3-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-羟基-5-甲基苯甲醛、1,4-二甲基吡啶碘代物和催化量的哌啶或吡咯烷，搅拌下加热回流5-8小时；

Ⅱ.将步骤Ⅰ中的反应液冷至室温，过滤，再用少量的乙醇洗涤滤饼，真空干燥得所述的比率型荧光分子探针，其结构式如(1)所示。

3.如权利要求2所述的一种线粒体靶向pH的比率型荧光探针的制备，其特征在于，所述的步骤a中2-羟基-3-甲基苯甲酸和邻氨基苯硫酚的摩尔比为1：1。

4.如权利要求2所述的一种实时监控线粒体靶向pH的比率型荧光探针的制备，其特征在于，所述步骤①中乌托品和2-(苯并[d]噻唑-2-基)-6-甲基苯酚的摩尔比为3:1-5:1。

5.如权利要求2所述的一种线粒体靶向pH的比率型荧光探针的制备，其特征在于，所述步骤Ⅰ中3-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-羟基-5-甲基苯甲醛和1,4-二甲基吡啶碘代物的摩尔比为1:1-1:1.5。

6.如权利要求2所述的一种实时监控线粒体靶向pH的比率型荧光探针的应用，其特征在于，所述的比率型荧光分子探针含有线粒体定位基团，能够在细胞线粒体内靶向比率荧光成像的应用。