1.一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)：多糖提取

将按照统计学方法取样得到的已知不同品种的药用石斛材料按照同种类混合，于50-

60℃的烘箱中烘干至恒重，并粉碎成粉，80℃-90℃的无水乙醇索氏提取至回流液无色，挥干溶剂，将所得石斛药渣按照料液比(0.5-1)：(5-7)加入蒸馏水中，并于75℃-85℃水浴冷凝回流提取4-5次，每次3-4h；接着，合并上述提取滤液并减压浓缩获得粗多糖溶液；

(2)：多糖纯化及浓缩

将所得粗多糖溶液按照体积比(0.5-1):(3-4)加入无水乙醇中，再于3-5℃冰箱中静置

20-30h，接着，3000-4000r/min转速下离心2-5min，且重复操作3-4次后留取沉淀，并进一步对其进行多糖纯化，其中，多糖纯化采用两步纯化法：①采用Sevage法对多糖溶液脱蛋白处理，实现第一步纯化；

②收集第一步纯化后多糖溶液，通过超滤装置超滤，脱去小分子物质并同时浓缩多糖溶液，实现第二步纯化至最终获得纯化后的多糖浓缩溶液；

(3)：色谱分析及色谱指纹图谱的建立

①色谱类型

高效体积排阻色谱HPSEC；

②色谱条件

流动相：0.1-0.2M醋酸钠；流速：0.5-1.0mL/min；柱温：35-45℃；进样量：20μL；

③多糖标准曲线的获得

将不同分子量的葡聚糖标准品配置成4-5mg/mL的水溶液分别进样于高效体积排阻色谱HPSEC中，再根据各相应色谱图计算多糖分子量标准曲线方程；

④样品分子量分布分析及色谱指纹图谱的建立

多糖纯化后的石斛样品分别进样于高效体积排阻色谱HPSEC，获取相应色谱图，再根据多糖分子量标准曲线方程计算出各样品的色谱曲线各部分的相对分子量，最终建立相应已知的石斛样品的色谱指纹图谱；

(4)：未知种类石斛的鉴定

将未知种类的石斛按照以上步骤(1)-(3)进行处理，以得到其对应色谱指纹图谱，再将其与已建立的已知的石斛样品的色谱指纹图谱进行相似度比较，当其相似度大于90％以上时，即可判定为同一类石斛属植物，否则不是同一种属。

2.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(1)中药用石斛的品种分别为：霍山石斛、铁皮石斛与细茎石斛。

3.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(1)中药用石斛材料包括药用石斛干品和鲜品，所述药用石斛干品又进一步包括枫斗、寸金、粉末；所述药用石斛鲜品具体为根系生长三年以上，当年抽条越冬后的石斛去叶鲜茎，并且，所述药用石斛鲜品需在切成薄片后混合使用。

4.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(1)中统计学方法为：在安徽大别山区采用五点取样法进行药用石斛样品的收集。

5.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用Sevage法具体步骤为：先将所得沉淀用蒸馏水溶解并混匀，接着，按照样品与萃取剂体积比(3-5)：(0.5-2)加入Sevage试剂，混匀振荡25-35min，再以3000-4000r/min离心5-6min，弃去除下层氯仿及中层变性蛋白；再取上层水溶液重复去蛋白操作，至无明显中层为止；最后，收集去蛋白后的上层水溶液。

6.根据权利要求5所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述Sevage试剂为体积比分别为(3-5)∶(0.5-1.5)的氯仿与正丁醇的混合液。

7.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(2)中超滤装置为滤膜截留分子量为1K的超滤装置。

8.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(3)中不同分子量的葡聚糖标准品的重均分子量Mw分别为：2000KDa、580KDa、70KDa、

10KDa、5KDa。

9.根据权利要求1所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(3)中多糖分子量标准曲线方程的计算方法为：根据各葡聚糖标准品的色谱峰保留时间和分子量对数，以标准品的分子量对数lgMw为纵坐标，色谱峰保留时间Rt为横坐标，使用线性方程拟合得多糖分子量标准曲线方程。

10.根据权利要求1-9任一所述的一种鉴别三种药用石斛的色谱指纹图谱方法，其特征在于，所述步骤(3)中色谱条件还包括：色谱柱型号及装柱方式：UltrahydrogelTM Linear 300mm×7.8mm，两根串联；检测器类型：示差折光检测器RID。