1.一种L-阿拉伯糖异构酶,其特征在于,它是通过将凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans NL01)的L-阿拉伯糖异构酶第279位苯丙氨酸突变为异亮氨酸而得到;
其中,所述的L-阿拉伯糖异构酶基因araA,其核苷酸序列的GenBank登记号为KX356659。
2.一株表达定点突变L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了权利要求1所述L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌。
3.权利要求2所述的表达定点突变L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将定点突变后的L-阿拉伯糖异构酶基因araAF279I克隆到大肠杆菌表达载体pETDuet-1的多克隆位点处,得到重组质粒pETDuet-araAF279I;
(2)将该质粒转化大肠杆菌Escherichia coli BL21,利用氨苄青霉素平板筛选得到阳F279I性转化子,即得到重组大肠杆菌E.coli BL21(pETDuet-araA )。
4.权利要求2所述的表达定点突变L-阿拉伯糖异构酶的大肠杆菌在催化制备D-塔格糖中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,它包括如下步骤:(1a)细胞的准备:将重组大肠杆菌按体积比为0.1~3%的量转接到发酵培养基中,当细胞OD600达到0.4~0.8后,加入终浓度为0.1~1mmol/L的IPTG,在16~30℃继续培养1~
12h,培养结束后,收集重组大肠杆菌;
(2a)催化方法:将步骤(1)中得到的重组大肠杆菌加入含有D-半乳糖的反应体系中,反应5min~100h催化制备D-塔格糖。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(1)中,所述的发酵培养基为蛋白胨
10g/L,酵母粉5g/L,氯化钠10g/L,氨苄青霉素100mg/L,溶剂为水。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,重组大肠杆菌的干菌添加量为
0.5~10g/L。
8.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,所述的反应体系,其D-半乳糖的初始浓度为1~500g/L。
9.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,所述的反应体系,其初始pH值为4~10。
10.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤(2)中,所述的反应体系,其反应的温度为20~80℃。