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专利号: 2016109764823
申请人: 河南科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于血糖仪检测盐酸克伦特罗残留的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)在磁珠表面包被盐酸克伦特罗完全抗原,封闭,得到免疫磁珠探针;

2)在胶体金溶液中加入二抗,混匀后加入转化酶,得到酶标二抗;

3)在待测溶液中加入免疫磁珠探针、盐酸克伦特罗抗体,免疫反应后磁分,得到磁珠/抗原-抗体免疫复合物;再加入酶标二抗,反应后磁分,得到磁珠/抗原-抗体/酶标二抗免疫复合物;

4)在磁珠/抗原-抗体/酶标二抗免疫复合物中加入蔗糖溶液,水解反应后,用血糖仪检测葡萄糖信号值,并根据标准曲线得到待测溶液中盐酸克伦特罗的残留量。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤1)中磁珠在包被抗原前先进行活化处理。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤2)中胶体金采用柠檬酸三钠还原法制备。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤2)中二抗与转化酶的质量比为1:8~

12。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤3)中免疫磁珠探针的加量为20~

30mg,盐酸克伦特罗抗体的浓度为1:1000~1:700,酶标二抗的浓度为1:800~1:400。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤4)中水解反应的时间为20~40min,反应温度40~60℃。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤4)中标准曲线的制作方法为:分别在系列浓度的盐酸克伦特罗标准品溶液中加入免疫磁珠探针、盐酸克伦特罗抗体,免疫反应后磁分,得到磁珠/抗原-抗体免疫复合物,再加入酶标二抗,反应后磁分,得到磁珠/抗原-抗体/酶标二抗免疫复合物;在上述免疫复合物中加入蔗糖溶液,水解反应后用血糖仪检测葡萄糖信号值,以标准品溶液浓度为横坐标,以添加标准品的血糖仪各信号值与无标准品添加的血糖仪信号值的比值为纵坐标,绘制标准曲线。