1.一种酶联免疫分析方法,其特征在于它由下述步骤组成:
(1)将待测抗原标准品加入pH值为7.4的PBS缓冲液中,配制1~10000pg/L抗原标准品溶液,将抗原标准品溶液加入到包被抗体的固相载体表面,使抗原与抗体键合,随后用洗涤缓冲液洗涤固相载体并拍干;
(2)将葡萄糖氧化酶标记的单克隆抗体溶解于pH值为7.4的PBS缓冲液后,加入到步骤(1)中键合抗原的固相载体表面,与键合在固相载体表面的抗原反应,随后用洗涤缓冲液洗涤固相载体并拍干;
(3)将葡萄糖水溶液加入到步骤(2)中获得的固相载体表面,30~37℃反应10~20分钟,加入葡萄糖氧化酶显色剂和催化量的辣根过氧化物酶进行显色反应,并测定光密度,绘制光密度随抗原标准品浓度的对数值变化的标准曲线;
(4)按照上述步骤(1)~(3)方法测试待测抗原样品对应的光密度,结合标准曲线的线性方程即可确定待测抗原样品中抗原的含量。
2.根据权利要求1所述的酶联免疫分析方法,其特征在于:在步骤(3)中,所述的葡萄糖氧化酶显色剂是4-氨基安替比林和N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐的显色体系。
3.根据权利要求1所述的酶联免疫分析方法,其特征在于:所述的洗涤缓冲液是由pH值为7.4的PBS缓冲液和吐温-20组成,其中吐温-20占洗涤缓冲液质量的0.1%。
4.根据权利要求1所述的酶联免疫分析方法,其特征在于:所述的固相载体为聚苯乙烯酶标板。