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专利号: 2016110798089
申请人: 河南科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高纳他霉素产量的发酵方法,以纳塔尔链霉菌为主要原料,依次经菌株活化、种子培养、发酵和纳他霉素的提取,得到所述纳他霉素;其特征在于:纳塔尔链霉菌发酵开始前向发酵培养基中加入大孔吸附树脂;纳塔尔链霉菌发酵12-24h时向发酵液中添加大豆油,纳塔尔链霉菌发酵24-48h时以流加方式向发酵液中加入缬氨酸和苏氨酸;

其中,所述大孔吸附树脂的添加量为每升发酵培养基中添加80-100g的大孔吸附树脂,所述大豆油的添加量为每升发酵液中添加40-50mL的大豆油,所述缬氨酸的添加量为每升发酵液中添加0.5-0.7g的缬氨酸,所述苏氨酸的添加量为每升发酵液中添加0.2-0.5g的苏氨酸。

2.根据权利要求1所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述菌株活化的具体步骤为:以纳塔尔链霉菌为原料,将纳塔尔链霉菌培养于固体斜面培养基上,在26-30℃下培养3-9天,得到纳塔尔链霉菌斜面菌株,4℃以下保藏;

所述固体斜面培养基的配方为:每100mL蒸馏水中含有葡萄糖1-2g,番茄浆1.5-2.5g,燕麦2-3g,琼脂1.5-2.0g,pH自然。

3.根据权利要求2所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述种子培养的具体步骤为:将所述纳塔尔链霉菌斜面菌株接种于液体种子培养基中,26-30℃培养2-3天,得到纳塔尔链霉菌种子液;

所述液体种子培养基的配方为:每100mL蒸馏水中含有葡萄糖0.8-1g,胰蛋白胨0.2-

0.5g,麦芽浸粉0.3-0.5g,氯化钠0.6-1g,pH为7.0-7.5。

4.根据权利要求3所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述发酵的具体步骤为:将所述纳塔尔链霉菌种子液以2-10%的接种量接到发酵培养基中,得到发酵液,培养条件为26-30℃,转速160-200r/min,发酵3-7天,得到纳塔尔链霉菌发酵液;

在纳塔尔链霉菌发酵开始前,向发酵培养基中加入大孔吸附树脂;在发酵过程中,在纳塔尔链霉菌发酵12-24h时,往发酵液中添加大豆油;在纳塔尔链霉菌发酵24-48h时,往发酵液中以流加的方式添加缬氨酸和苏氨酸;

所述发酵培养基的配方为:每1000mL蒸馏水中含有葡萄糖30-45g,酵母浸出粉1-3g,牛肉膏5-15g,pH为7.0-7.5。

5.根据权利要求4所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述纳他霉素的提取的具体步骤为:采用甲醇提取法,将甲醇与所述纳塔尔链霉菌发酵液以体积比为9-10:

1的比例混合后,充分混合后离心,离心转速10000r/min,离心时间为10-20min,取上清液,将上清液用0.22um滤膜过滤,所得滤液即为所述纳他霉素溶液。

6.根据权利要求1所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述大孔吸附树脂为HPD450大孔树脂。

7.根据权利要求1所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述的纳塔尔链霉菌为纳塔尔链霉菌属中的任何菌株。

8.根据权利要求7所述的提高纳他霉素产量的发酵方法,其特征在于,所述纳塔尔链霉菌为纳塔尔链霉菌4.3526。