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专利号: 2016112133696
申请人: 南京林业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一株高效产紫杉醇真菌,其分类命名为棘孢曲霉(Aspergillus aculeatinus)Tax-

6,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2016614,保藏日期为2016年

11月3日,保藏地址为中国武汉武汉大学。

2.权利要求1所述的棘孢曲霉Tax-6在制备紫杉醇中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:制备紫杉醇的方法为液态发酵。

4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的液态发酵为:从4℃冰箱中取出保存有Aspergillus aculeatinus Tax-6的PDA平板,于28℃生化培养箱中,活化菌种2-3天;在灭菌台上,向已活化过的平板中加无菌水,用接种针轻轻地将菌丝上孢子刮于无菌水中,混匀,无菌过滤,制成孢子悬液,用无菌枪头吸取孢子悬液,接种到含有100mL PDB液体培养基的250mL锥形瓶中,接种好的锥形瓶放置于120rpm、30℃摇床中培养。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述的液态发酵培养6-12天。

6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于:所述的液态发酵培养7天。

7.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:从发酵液中提取紫杉醇的方法为:用四层纱布过滤发酵液取液体部分,加入正己烷萃取,保留水相;用等体积的二氯甲烷萃取发酵液中的紫杉醇,萃取数次,合并有机相;将得到的有机相蒸干得固体产物,用二氯甲烷溶解得到的固体产物,再蒸干后加入甲醇溶解获得紫杉醇甲醇溶液。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:正己烷萃取一次,萃取20min。

9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:二氯甲烷萃取3次,每次30min。