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专利号: 2016112226281
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种分泌性提高的碱性果胶酶突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体或细胞系。

4.一种提高碱性果胶酶分泌能力的方法,其特征在于,将SEQ ID NO.3所示序列的双亲短肽AEAEAKAKAEAEAKAK突变为ADADARARADADARAR。

5.一种产碱性果胶酶的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主,pET-22b(+)为载体,表达SEQ ID NO.1所示的碱性果胶酶突变体。

6.一种产碱性果胶酶的方法,其特征在于,所述方法是将权利要求5所述的基因工程菌接种至发酵培养基中,200~220rpm,30~37℃发酵24~72h。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述接种是按体积以3~5%的接种量接种种子液。

8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,所述发酵过程中加入终浓度为0.02~

0.06mmol/L IPTG进行诱导。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述发酵具体是:以按体积比3~5%的接种量接入TB培养基中,37℃,200r·min-1培养至菌体浓度OD600=0.4,加入终浓度0.04mM IPTG进行诱导,28~30℃下诱导36~48h。

10.权利要求5所述的基因工程菌在食品、环境、纺织、造纸领域制备碱性果胶酶中的应用。