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专利号: 2016112226436
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种碱性果胶酶突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述碱性果胶酶突变体的基因。

3.含有权利要求1所述碱性果胶酶突变体的载体或细胞系。

4.一种提高碱性果胶酶热稳定性的方法,其特征在于,将SEQ ID NO,3所示碱性果胶酶的N端通过PT-Linker连接SEQ ID NO.4所示的双亲短肽。

5.一种产碱性果胶酶的基因工程菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主、以pET-22b(+)为载体,表达SEQ ID NO.1所示碱性果胶酶突变体。

6.权利要求5所述基因工程菌的构建方法,是以pET-22b(+)为载体,将SEQ ID NO.2所示基因与载体连接,转化至大肠杆菌中。

7.一种碱性果胶酶的生产方法,其特征在于,是将所述基因工程菌接种至发酵培养基,于30~37℃培养至OD600=0.6~1.0,加入终浓度0.04~0.06mmol/L的IPTG,于28~30℃诱导24~72h。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述接种是按体积接种3~5%的种子液。

9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于,发酵培养基为TB培养基。

10.权利要求4所述的基因工程菌在在纺织、食品、造纸、环境领域制备碱性果胶酶中的应用。