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专利号: 2016112311693
申请人: 河南科技学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种氟喹诺酮类药物包被抗原,为吡哌酸-鸡卵清白蛋白偶联物,具有式Ⅰ所示结构:式I中,OVA为鸡卵清白蛋白。

2.权利要求1所述包被抗原的制备方法,包括以下步骤:

1)将3-氨基丁酸溶于氢氧化钠溶液,得到3-氨基丁酸溶液;

将吡哌酸溶于含N,N-二甲基甲酰胺的甲醇溶液中,得到吡哌酸溶液;

将所述3-氨基丁酸溶液滴加到所述吡哌酸溶液中,进行碳链衍伸化反应1.5~3h;

将所述反应得到的产物用乙酸乙酯萃取,将所述萃取得到的中间产物酸洗后用碳酸氢钠溶液反萃取,得到吡哌酸半抗原;

2)将所述步骤1)得到的吡哌酸半抗原溶于N,N-二甲基甲酰胺中,再与三乙胺混合,4~

8℃反应活化1~2h,得到吡哌酸半抗原反应液;

将氯甲酸异丁酯与所述吡哌酸半抗原反应液混合,进行混合酸酐偶联反应1~2h,得到吡哌酸反应产物;

3)将鸡卵清白蛋白溶于碳酸盐缓冲液中,再与N,N-二甲基甲酰胺反应0.5~1h,得到鸡卵清白蛋白溶液;

4)将所述步骤2)得到的吡哌酸反应产物滴加到所述步骤3)得到的鸡卵清白蛋白溶液中,4~8℃反应5~8h后透析,得到包被抗原;

所述步骤2)和步骤3)之间、步骤1)和步骤3)之间没有时间顺序的限制。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中含N,N-二甲基甲酰胺的甲醇溶液中N,N-二甲基甲酰胺的体积百分含量为40~60%。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中吡哌酸半抗原的质量和三乙胺的体积比为(1.5~2.5)mg:1μL;所述吡哌酸半抗原的质量和氯甲酸异丁酯的体积比为(1.5~2.5)mg:3μL。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤4)中吡哌酸反应产物的质量以吡哌酸半抗原计,与鸡卵清白蛋白的质量比为1:(2~3)。

6.基于诺氟沙星簇多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡,包括塑料盒体,所述塑料盒体一端设置有加样孔,设置在所述塑料盒体中的试纸条,所述试纸条包括支撑层,设置在所述支撑层上的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫,所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线,其特征在于,所述检测线处设置有氟喹诺酮类药物包被抗原,所述质控线处设置有羊抗兔IgG,所述结合垫上灌注有胶体金标记的抗诺氟沙星簇多克隆抗体;

所述包被抗原为权利要求1所述的包被抗原或权利要求2所述制备方法制备得到的包被抗原。

7.根据权利要求6所述的试纸卡,其特征在于,所述抗诺氟沙星簇多克隆抗体是由诺氟沙星-牛血清白蛋白偶联物免疫新西兰大白兔制备得到;所述诺氟沙星-牛血清白蛋白偶联物具有式Ⅱ所示结构:

8.根据权利要求6所述的试纸卡,其特征在于,所述包被抗原的浓度为0.1~0.2μg/ml。

9.根据权利要求6或7所述的试纸卡,其特征在于,所述多克隆抗体的浓度为0.2~

0.3mg/ml。

10.权利要求6~9任意一项所述试纸卡在检测检测氟喹诺酮类药物残留中的应用,所述氟喹诺酮类药物包括诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、恩诺沙星、依诺沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、氨氟沙星、二氟沙星、马波沙星、氟甲喹和恶喹酸中的一种或多种。