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专利号: 201710023904X
申请人: 湖南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鉴定疖蝙蛾Endoclita nodus(Chu and Wang,1985) 的DNA标准检测基因序列,其特征在于所述标准检测基因为CO I基因,具有如下所述的基因序列SEQ ID NO.1:ttttattttt ggtatttgag caggaataat tggaacttcg ttaagattat taattcgaac  60agaattaggt aatcctggat ctttaattgg agatgatcaa atttataatg taattgtaac  120agcacatgct tttattataa ttttttttat agttatacct attataattg gtggatttgg  180taattgatta gtacctttaa tattaggagc tcctgatata gcttttccac gattaaataa  240tataagattt tgattattac ccccttcatt aatactatta atttctagaa gaattgtaga  300aaatggagct ggaacaggtt gaacagtcta tcccccatta tctgcaaata ttgcacatgc  360tggtagatca gtggatttag caattttttc cttacattta gcaggtattt catctatttt  420aggggcagtc aattttatta caactgtaat taatatacga tcggaaggaa tatcttttga  480ccgaatacca ttatttgtat gaagagttgc aattactgct ttattacttt tattatcttt  540acctgtatta gcaggagcta ttactatatt actaacagac cgaaatttaa atacttcatt  600ttttgaccct gctgggggag gggatcctat tttataccaa catttatttt gatttttt   658。

2.权利要求1所述的疖蝙蛾DNA标准检测基因的PCR引物,其特征在于PCR引物序列为:

正向引物 5’-ATTCAACCAATCATAAAGATATTGG-3’

反向引物 5’-TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA-3’。

3.一种疖蝙蛾的分子鉴定方法,包括:

1) 从待测的疖蝙蛾组织中分离提取DNA;

2) 以该DNA为模板用一对引物,正向引物 5’-ATTCAACCAATCATAAAGATATTGG-3’,反向引物 5’-TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA-3’,通过聚合酶链式反应扩增出疖蝙蛾CO I基因;

3) 取适量步骤2)的聚合酶链式反应扩增出的CO I基因用琼脂糖电泳分离,紫外灯观察,根据扩增产物的大小判定结果,如果能特异性扩增出658bp左右的条带,送生物公司测序;

4) 根据测序结果,如果与所述基因序列SEQ ID NO.1的同源性在98%以上,即可判断所述的待测昆虫标本、组织和虫草菌寄主即为疖蝙蛾。