1.萝卜提取物中氧化型和还原型萝卜硫苷的同步定量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将氧化型和还原型萝卜硫苷标准品溶解于甲醇-水溶液,作为标准品储备液;利用甲醇-水溶液将所述标准品储备液倍比稀释,微孔滤膜过滤,得系列质量浓度的标准品溶液;
(2)称取75mg待测萝卜提取物,溶解于5mL甲醇-水溶液,微孔滤膜过滤,得萝卜提取物样品溶液;
(3)将步骤(1)所得系列质量浓度的标准品溶液和步骤(2)所得萝卜提取物样品溶液分别进行高效液相色谱检测分析,分别获得标准品溶液、样品溶液中氧化型和还原型萝卜硫苷的色谱峰面积;
检测条件如下:5μm,4.6×250mm的DIKMA Diamodsil C-18色谱柱,进样量为5μL,柱温为30℃;流动相A为甲醇/浓度为0.1%的三氟乙酸水溶液=1/99,v/v;流动相B为甲醇/浓度为0.1%的三氟乙酸水溶液=3/7,v/v;梯度洗脱模式,30分钟内流动相B比例从0%线性增加至100%;流动相流速为1mL/min;流动相用量为1000mL;紫外线检测波长为235nm;采用外标法定量;
(4)根据步骤(3)所得检测结果,以系列标准品溶液中氧化型和还原型萝卜硫苷的质量浓度X为横坐标,对应色谱峰面积Y为纵坐标进行线性回归分析,分别建立氧化型和还原型萝卜硫苷的标准曲线方程;
(5)根据步骤(3)所得检测结果,分别将样品溶液中氧化型和还原型萝卜硫苷的色谱峰面积代入步骤(4)所得对应的曲线方程中,获得样品溶液中氧化型和还原型萝卜硫苷的质量浓度,计算获得萝卜提取物中氧化型和还原型萝卜硫苷的含量。
2.根据权利要求1所述的同步定量检测方法,其特征在于,所述步骤(1)中的系列质量浓度的标准品溶液中氧化型和还原型萝卜硫苷的质量浓度均为0.0625-2.000mg/mL。
3.根据权利要求1所述的同步定量检测方法,其特征在于,所述步骤(1)和(2)中的甲醇-水溶液均为甲醇和水按照1:99的体积比制得的;所述微孔滤膜为孔径0.45μm的有机滤膜。
4.根据权利要求1所述的同步定量检测方法,其特征在于,所述步骤 (2)中的萝卜提取物为萝卜种子、萝卜芽苗或萝卜根茎的提取物。
5.根据权利要求1所述的同步定量检测方法,其特征在于,所述步骤(4)中的氧化型萝卜硫苷的标准曲线方程为:Y=1.2270+48.7148X,R=0.9994;还原型萝卜硫苷的标准曲线方程为:Y=0.2273+76.9141X,R=0.9999。
6.根据权利要求1所述的同步定量检测方法,其特征在于,所述步骤(5)中的萝卜提取物中氧化型萝卜硫苷的含量计算方程为:氧化型萝卜硫苷的含量=5×氧化型萝卜硫苷的质量浓度÷萝卜提取物样品质量×100%;萝卜提取物中还原型萝卜硫苷的含量计算方程为:还原型萝卜硫苷的含量=5×还原型萝卜硫苷的质量浓度÷萝卜提取物样品质量×
100%。