1.一种端粒酶活性比色检测法,其特征在于它由下述步骤组成:
(1)将氨基化的磁珠与醛基化的端粒酶引物反应,使端粒酶引物偶联到磁珠表面,并用戊醛与磁珠表面多余的氨基反应,制备成磁珠/端粒酶引物复合物;
(2)将待测细胞进行裂解提取端粒酶,以提取的端粒酶RNA为模板,对磁珠/端粒酶引物复合物进行延长;
(3)将磁珠/端粒酶引物复合物和步骤(2)的延长产物分别与生物素修饰的cDNA探针进行杂交;
(4)将步骤(3)的两个杂交产物分别与链霉亲和素-辣根过氧化物酶在37℃下培育30~
40分钟;
(5)将步骤(4)的两个培育产物分别与3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色液在33~37℃下反应10~20分钟,反应完后,观察两个溶液的颜色,若待测细胞对应溶液的颜色比磁珠/端粒酶引物复合物对应溶液的颜色深,说明待测细胞有活性端粒酶,否则,待测细胞无活性端粒酶。
2.根据权利要求1所述的端粒酶活性比色检测法,其特征在于:所述醛基化的端粒酶引物的序列为5’-CHO-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAATCCGTCGAGCAGAGTT-3’。
3.根据权利要求2所述的端粒酶活性比色检测法,其特征在于:所述生物素修饰的cDNA探针的序列为5’-生物素-TTTTTTTTTTCCCTAACCCTAACCCTAA-3’。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的端粒酶活性比色检测法,其特征在于:所述的3,
3',5,5'-四甲基联苯胺显色液是1.0mg/mL 3,3',5,5'-四甲基联苯胺的乙醇溶液、pH=5.2的柠檬酸-Na2HPO4缓冲溶液、体积浓度为30%的H2O2水溶液按照体积比100:900:1的混合液。