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专利号: 2017102300112
申请人: 浙江农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于方法包括以下步骤:

1)将白蚁放置于两面通风的特制风洗装置(1)中,用冷风源向特制风洗装置(1)吹风进行风洗以除去白蚁体表的浮沉和污秽;

2)将经风洗的白蚁投入盛有醛类固定液的特制辅助抽真空装置(2)中,进行抽真空操作,使得白蚁下沉到电镜样品处理前固定液中;

3)将已沉入前固定液中的白蚁置于4℃进行充分前固定,前固定结束后取出虫体在冰上进行解剖,然后将解剖后获得的目的组织放入0-4℃缓冲液中在体视镜视野中进行漂洗,漂洗至在体视镜视野下观察不到白蚁样品表面存有体内溢出物质;

4)将漂洗后的样本放入0-4℃的缓冲液中,用超声清洗仪进行脱气清洗,期间更换新的缓冲液重复多次,直到将白蚁样品表面清洗干净;

5)将白蚁样品进行后固定,再经后漂洗及逐级脱水处理后放入特制滤纸筒(3)中并封闭特制滤纸筒(3),再将特制滤纸筒(3)放入临界点干燥框中并与临界点干燥框内壁牢固紧贴,进行临界点干燥;

6)放样前,滤纸筒(3)和临界点干燥框下部先用纯脱水剂浸润;

7)在体视镜下对充分干燥后的白蚁样品进行贴台粘样,用解剖镊和解剖针解剖下样品的目标组织二次粘样;

8)用精细解剖针蘸取导电银胶将非二次粘样样品的非目标观察区域与粘样胶带进行连接;

9)待银胶干燥后,对白蚁样品及样品台进行偶数次对称喷金处理;

所述的特制风洗装置(1)包括筒体(11)、筛网(12)和手柄(13),筒体(11)的两端端面均设置有筛网(12),筒体(11)侧面连接有用于手握的手柄(13);

所述的特制辅助抽真空装置(2)包括锥形管(21)、管盖(22)、中空圆台(23)、透气耐水表面洁净平整的可折叠材料(24)、液面(25)和通孔(26),锥形管(21)从顶端到底端直径逐渐变小,锥形管(21)底端封闭,锥形管(21)顶端开口并连接有管盖(22),管盖(22)上开有用于抽真空的通孔(26),锥形管(21)内盛有电镜样品处理前固定液,白蚁或其头部感觉附肢置于前固定液;锥形管(21)内还置有两端开口的中空圆台(23),两端开口的中空圆台(23)底端覆有材料(24),材料(24)与前固定液的液面(25)相平齐接触;

所述的特制滤纸筒(3)是由滤纸(31)通过折卷而成,滤纸(31)沿短边方向通过弯折或者卷曲成具有中空内腔的筒状结构,然后再两端向中间弯折使得中空内腔与外界不直接相通。

2.根据权利要求1所述的一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于:所述步骤3)中的充分前固定的时间为24h-7d。

3.根据权利要求1所述的一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于:所述步骤7)和8)中的精细解剖针为据实验所需选用不同型号昆虫针用不同目数砂纸磨制而成。

4.根据权利要求1所述的一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于:所述步骤9)喷金处理具体是将样品台依次沿东、南、西、北四个方向倾斜放置,每个方向倾斜放置的喷涂时间为预设总时间的1/4。

5.根据权利要求1所述的一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于:所述的两端开口的中空圆台(23)大端朝下并覆有透气耐水表面洁净平整的可折叠材料(24),小端朝上并开口。

6.根据权利要求1所述的一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于:所述的透气耐水表面洁净平整的可折叠材料(24)采用滤纸、无尘纸或者擦镜纸。