1.一种诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:包括如下步骤:
步骤1:剪取树莓无菌苗两叶片间的茎段作为外植体,接种到愈伤组织诱导培养基上,得到树莓的松散型愈伤组织;
步骤2:取培养好的松散型愈伤组织,接种到只有无菌水的无菌培养皿中,进行饥饿诱导培养,得到胚性愈伤组织;
步骤3:将所述胚性愈伤组织接种到MS培养基中,进行胚状体培养,得到球形胚。
2.根据权利要求1所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
1中,愈伤组织培养基为1/2MS+0.5-1.0mg/L 2,4-D+100mg/L Vc+20g/L蔗糖,PH值5.8。
3.根据权利要求2所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
1中,愈伤组织培养条件为23-25℃,光照时间12小时,光照强度为500-1000lux,培养时间
14-21天。
4.根据权利要求1所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
2中,的饥饿诱导方法是将树莓松散型愈伤组织切成大小2mm的小块,无菌的培养皿内放置无菌滤纸,培养皿中加入少量的无菌水,水量以全部浸湿滤纸为准。
5.根据权利要求4所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
2中,的饥饿诱导培养条件是:光照强度为2000lux,光照时间为24h;温度为23℃,饥饿诱导时间为6d。
6.根据权利要求1所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
3中,胚性愈伤组织接种到MS+20g/L蔗糖培养基中,PH值5.8。
7.根据权利要求6所述的诱导树莓愈伤组织形成球形胚的方法,其特征在于:所述步骤
3中,胚性愈伤组织培养条件是:光照强度为500-1000lux,光照时间为12h;温度为23-25℃℃,培养时间14-21d。