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专利号: 2017102935799
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于生产以高甘露糖型糖链为主要N‑糖链结构的糖蛋白的动物细胞株,其特征在于,所述细胞株的高尔基体甘露糖苷酶基因I基因MAN1A1和MAN1A2被敲除。

2.根据权利要求1所述的动物细胞株,其中,所述细胞株的内质网甘露糖苷酶基因MAN1B1进一步被敲除。

3.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述高甘露糖型糖链为选自Glc1‑Man9‑GlcNAc2、Man9‑GlcNAc2、Man8‑GlcNAc2、Man7‑GlcNAc2、Man6‑GlcNAc2和Man5‑GlcNAc2中的至少一种。

4.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述细胞株来自选自人胚肾细胞HEK293、中国仓鼠卵巢细胞CHO、COS、3T3、myeloma、BHK、HeLa、Vero中的哺乳动物细胞、或者选自爪蟾卵子细胞或昆虫细胞Sf9、Sf21、Tn5中的两栖类动物细胞。

5.根据权利要求4所述的动物细胞株,其中,所述细胞株来自人胚肾细胞HEK293或中国仓鼠卵巢细胞CHO。

6.根据权利要求1所述的动物细胞株,其中,所述细胞株为MAN1A1/A2基因双敲除细胞株A1/A2–double‑KO,保藏号为CCTCC No:C201767。

7.根据权利要求2所述的动物细胞株,其中,所述细胞株为MAN1A1/A2/B1基因三敲除细胞株A1/A2/B1‑triple‑KO,保藏号为CCTCC No:C2016193。

8.根据权利要求1或2所述的动物细胞株,其中,所述糖蛋白为人α‑半乳糖苷酶或人溶酶体脂肪酶。

9.一种生产以高甘露糖型糖链为主要N‑糖链结构的糖蛋白的方法,其特征在于,使用权利要求1~8中任一项所述的动物细胞株。