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专利号: 2017103013401
申请人: 嘉兴学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种毛绒制品的快速分子鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从毛绒制品中提取线粒体DNA;

从毛绒制品中提取线粒体DNA具体包括:

将毛绒制品用液氮研磨,然后采用Biomiga试剂盒,按照Biomiga试剂盒的步骤,得到线粒体DNA;

所述的液氮研磨的条件为:采用冷冻干燥器,先预冷3min~7min,然后以每秒5~15次的速率运行,0.5~3min内运行1~3个循环,再冷却0.5~3min;

(2)采用羊绒特异性引物、羊毛特异性引物以及羊驼绒特异性引物进行PCR特异性扩增;

所述的羊绒特异性引物为:上游引物为catcactaatcttctttcagcaatc,下游引物为tgtggaggaagggtacaagtact;

所述的羊毛特异性引物:上游引物为cattgatctcccagctccatcaaatatt,下游引物为attgtcgcaaataggaggattactccg;

所述的羊驼绒特异性引物:上游引物为attatgcaaatcatgacaggactatttc,下游引物为atatttcaagtttctaggaaggcgtagg;

所述的PCR特异性扩增的反应条件为:90℃~95℃预变性3~10min,90℃~99℃变性

15s~1min,30℃~45℃复性30s~1min,65℃~80℃延伸30s~1min,经过20~40个循环后,最后65℃~80℃延伸5~15min;

(3)将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察结果,如果出现相应的条带,则鉴定含有羊绒、羊毛、羊驼绒成分,不出现相应的条带,则不含相应的成分。