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专利号: 2017103130871
申请人: 广西中医药大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种响应面法优化龙眼叶总黄酮的提取工艺,其特征在于,所述提取工艺为龙眼叶粉末加入一定量的乙醇溶液进行回流提取,在单因素试验结果的基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,选取乙醇浓度、乙醇用量和提取时间三个因素作为响应变量,以单因素实验最优点为中心,围绕最优点上下各取1个水平值作为响应面的水平,分别编码-1、0、1,以龙眼叶总黄酮提取得率作为响应值,对各因素进行多项式拟合回归,得到回归方程:Y=15.37+0.30A-0.059B+0.17C+0.067AB+0.18AC+0.060BC-0.78A2-0.20B2-0.063C2,式中,A为乙醇体积浓度,B为乙醇溶液用量,C为提取时间,Y为龙眼叶总黄酮得率;对上述回归方程进行计算,得到龙眼叶总黄酮的最佳提取工艺条件。

2.如权利要求1所述的一种响应面法优化龙眼叶总黄酮的提取工艺,其特征在于,所述单因素试验的方法步骤如下:

(1)对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的芦丁对照品0.0203g置于100mL容量瓶-1

中,加入体积浓度70%乙醇溶液稀释至刻度,摇匀,即成0.203mg·mL 的芦丁对照品溶液;

(2)供试品溶液的制备:取龙眼叶药材粉末1g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,称重后按一定条件提取,后用提取溶剂补足重量,摇匀,滤过,精密量取10mL续滤液至25mL容量瓶中,定容至刻度,即为龙眼叶供试品溶液;

(3)测定方法及波长的选择:精密量取对照品和供试品溶液各1.0mL,分别置于50mL容量瓶中,加入质量浓度5%的NaNO2溶液1mL,摇匀,放置6min;然后加入质量浓度10%的Al(NO3)3溶液1mL,摇匀,放置6min;再加入质量浓度4%的NaOH溶液10mL,摇匀,用提取溶剂定容至刻度,放置15min,最后再以相应试剂作空白,照紫外可见分光光度法,在400~800nm测定吸收光谱图;最后选择506nm作为测定波长;

(4)提取方式的试验:分别取龙眼叶药材粉末3份,每份约1g,精密称定,加入20mL体积浓度95%乙醇溶液,分别采用超声、回流和浸渍各提取30分钟,分别精密量取步骤(2)所述的龙眼叶供试品溶液3份各1.00mL,分别置于50mL量瓶中,分别按步骤(3)方法测定并计算龙眼叶总黄酮含量;结果表明回流提取的提取率最高,故选择回流提取作为龙眼叶药材的提取方式;

(5)提取溶剂的试验:分别取龙眼叶药材粉末3份,每份约1g,精密称定,分别加入20mL的水、体积浓度100%甲醇、体积浓度95%乙醇溶液,分别回流提取30分钟,分别精密量取步骤(2)所述的龙眼叶供试品溶液3份各1.00mL,分别置于50mL量瓶中,分别按步骤(3)方法测定并计算龙眼叶总黄酮含量;结果表明乙醇作为溶剂的提取率最高,故选择乙醇作为提取溶剂;

(6)溶剂浓度的试验:分别取龙眼叶药材粉末6份,每份1g,精密称定,分别加入30mL的体积浓度分别为30%、40%、50%、60%、70%、95%乙醇溶液,分别回流提取30分钟,分别精密量取步骤(2)所述的龙眼叶供试品溶液6份各1.00mL,分别置于50mL量瓶中,分别按步骤(3)方法测定并计算龙眼叶总黄酮含量;结果表明用体积浓度50%乙醇提取龙眼叶总黄酮提取率最高;

(7)溶剂用量的试验:分别取龙眼叶药材粉末6份,每份1g,精密称定,分别加入体积浓度50%的乙醇溶液20mL、30mL、40mL、50mL、60mL、70mL,分别回流提取30分钟,分别精密量取步骤(2)所述的龙眼叶供试品溶液6份各1.00mL,分别置于50mL量瓶中,分别按步骤(3)方法测定并计算龙眼叶总黄酮含量;结果表明体积浓度50%乙醇溶液用量为60mL提取龙眼叶总黄酮提取率最高;

(8)提取时间的试验:分别眼叶药材粉末4份,每份1g,精密称定,分别加入体积浓度

50%乙醇溶液60ml,分别回流提取30min、60min、90min、120min,分别精密量取步骤(2)所述的龙眼叶供试品溶液4各1.00mL,分别置于50mL量瓶中,分别按步骤(3)方法测定并计算龙眼叶总黄酮含量;结果表明回流时间为60min提取龙眼叶总黄酮的提取率最高。

3.如权利要求1所述的一种响应面法优化龙眼叶总黄酮的提取工艺,其特征在于,所述龙眼叶总黄酮最佳提取工艺条件为:按1g的龙眼叶粉末,乙醇体积浓度52.81%,乙醇溶液用量56.67mL,提取时间82.89min。