1.一种非诊断目的的检测鼠伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于以鲁米诺还原氯金酸，得到鲁米诺胶体金纳米粒子LumAuNPs，以探针DNA修饰LumAuNPs，得化学发光探针；然后用发卡结构的捕获DNA修饰磁珠得捕获DNA修饰磁珠；以适体DNA和适体互补序列DNA修饰磁珠，得DNA修饰磁珠；将含目标物鼠伤寒沙门氏菌溶液加入DNA修饰磁珠溶液中，在DNA修饰磁珠溶液中鼠伤寒沙门氏菌与适体特异性结合把适体互补序列DNA释放到溶液中，磁分离后吸取清液加入到捕获DNA修饰磁珠溶液中，适体互补序列DNA与捕获DNA修饰磁珠中的捕获DNA发生杂交反应，使得捕获DNA的发卡结构打开，在化学发光探针上的探针DNA杂交作用下，通过催化发卡自组装技术将化学发光探针连接在磁珠表面；经过磁分离后，再加入羟胺-O-磺酸，以LumAuNPs—羟胺-O-磺酸为化学发光体系，进行化学发光测定，根据产生的化学发光实现鼠伤寒沙门氏菌的测定；LumAuNPs—羟胺-O-磺酸为化学发光体系，提高了检测信号强度；在探针DNA中引入三个错配碱基降低了背景信号，提高了测定灵敏度；

测定步骤如下：

(1)鲁米诺胶体金纳米粒子的制备：实验开始前，将所用的玻璃仪器用HNO3/HCl体积比为3:1的王水浸泡24h后，用二次蒸馏水冲洗，放入烘箱烘干；取一定量的1％的氯金酸溶液加去离子水稀释成0.02％的氯金酸溶液并置于三口烧瓶中，在磁力搅拌下加热回流煮沸；

待溶液沸腾后，快速加入0.01mL～5mL 0.01M的鲁米诺溶液，继续加热煮沸，溶液的颜色由浅黄色变为黑色，最后变成酒红色，40min后停止加热，并在继续搅拌下冷却至室温，得鲁米诺胶体金纳米粒子，即LumAuNPs，将制得的LumAuNPs转移到棕色广口瓶中，4℃下保存备用；

(2)捕获DNA修饰磁珠的制备：取10μL～100μL羧基化磁珠溶液放入1.5mL离心管中，用

10μL～200μL浓度为0.1M咪唑缓冲液洗涤三次，然后分散到0.01mL～2mL含有0.1M EDC和

0.05M NHS的0.1M咪唑缓冲液中，在37℃条件下，振荡反应30min；然后向离心管中加入10μL～200μL浓度为5.0×10-8M捕获DNA，在37℃条件下振荡过夜，得到捕获DNA修饰磁珠，然后再用2.0mL 0.1M PBS缓冲溶液清洗三次，最后分散到2.0mL PBS缓冲溶液中，4℃保存；

(3)探针DNA修饰LumAuNPs的制备：将1μL～20μL的TCEP加到10μL～200μL浓度为1.0×

10-6M的探针DNA溶液中，37℃条件下振荡活化1小时，再取100μL～1000μL合成好的LumAuNPs加入到该溶液中，在37℃条件下震荡过夜，然后再加入10μL～200μL含0.3M NaCl pH 8.2的

10mM Tris-HCl缓冲液；继续震荡48h后，在12000rpm的条件下离心30min后，将红色沉淀用

1mL pH 7.4的0.1M PBS缓冲溶液清洗，再次离心，如此重复三次，得探针DNA修饰LumAuNPs，即化学发光探针；最后得到的化学发光探针分散到1000μL pH 7.4的0.1M PBS缓冲溶液中，

4℃保存备用；

(4)DNA修饰磁珠的制备：取10μL～200μL羧基磁珠放入1.5mL离心管中，用10μL～200μL pH 7.0浓度为0.1M咪唑缓冲液洗三次，然后分散到1mL含有0.1M EDC和0.05M NHS的0.1M咪-唑缓冲液中，37℃条件下振荡反应30min；然后在离心管中同时加入10μL～500μL 5.0×10

8M的鼠伤寒沙门氏菌适体和10μL～500μL 5.0×10-8M的适体互补序列DNA，37℃条件下振荡过夜，得到的DNA修饰磁珠用2.0mL 0.1M pH 7.4PBS清洗三次，最后分散到2.0mL PBS中，4℃保存；

(5)鼠伤寒沙门氏菌的检测：取10μL～200μL DNA修饰磁珠溶液置于离心管中，然后取

10μL～100μL含鼠伤寒沙门氏菌的溶液加入到离心管中，37℃条件下震荡反应，通过鼠伤寒沙门氏菌与其适体的特异性结合把适体互补序列DNA释放到溶液中，磁分离后吸取清液加入到10μL～100μL捕获DNA修饰磁珠溶液中，同时加入10μL～100μL化学发光探针，37℃条件下震荡反应2h后，将磁珠用0.1M PBS缓冲液清洗三次，加入100μL NaOH，待基线稳定后，用注射器注入100μL 3mM的羟胺-O-磺酸，开始记录化学发光强度，用峰值来衡量化学发光强度的大小。

2.根据权利要求1所述的非诊断目的的检测鼠伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于所述的DNA序列如下：

捕获DNA：5’-NH2-CCC GGT AGT TAT TCA AAG ATG AGT CTA CCG GGT TTA ATC CAC TCA TCT TTG AAT AA-3’；

适体互补序列DNA：5’-ACT CAT CTT TGA ATA ACT ACC GGG-3’；

适体DNA:5’-NH2-AGTAATGCCCGGTAG TTA TTC AAA GAT GAG TAG GAA AAG A-3’探针DNA：5’-AGA TGA GTG GAT TAA ACC CGG TAG ACT CAT CTT TGA ATT CGT ACC GGG TTT AAT CCC ACG AGA TAC TGT TCC-SH-3’；

其中探针DNA的自5’端起第39、40和41三个碱基为错配碱基。