1.一种同时检测17种结合态杂环胺含量的方法，其特征在于，包括：准确称取4g牛肉饼粉末于大试管中，添加30mL 1mol/L氢氧化钠溶液与之混合，采用新型T18高速分散机分散混匀1min，将处理好的肉糜转移至150mL三角瓶中，加入15g硅藻土，搅拌混匀，添加50mL乙酸乙酯超声萃取30min，重复进行两次萃取，收集滤渣，装入耐压瓶内，加入40ml 6mol/L的盐酸，并用氮气鼓吹2min，于110℃水解24h，其中，牛肉饼烘烤温度为150℃；

水解液用超纯水定容至250ml，取10ml过固相萃取柱，采用氮吹仪将收集的杂环胺洗脱液吹干，并用500μL色谱甲醇复溶，之后采用0.22μm有机针头式滤器过滤，提取得到结合态杂环胺；

液质联用检测：

仪器：ACQUITY UPLC TQD超高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用仪;色谱柱：CORTECSIH UPLC® C18+，2.1mm*150mm  ,1.6μm；柱温：45℃；流动相：A相为

100%乙腈，B相为3mmol/L乙酸铵，B相pH＝4 .75；洗脱梯度：0～0.1min为4%A，0.1 18min为~

40%A，18～20min为70%A，20～22min为100%A，22～22.1min为4%A，其中A相为有机相，B相为水相；

流速：0.3mL/min；

样品室温度：4℃；

柱温：45℃；

进样量：5μL；

质谱条件：

选择多反应监测技术；

离子化方式：电喷雾ESI正离子模式二级质谱；

离子源温度：110℃；

脱溶剂气温度：400℃；

毛细管电压：3 .5kV；

锥孔氮气流量：50L/h；

脱溶剂氮气流量：700L/h；

碰撞氩气流量：0 .13mL/min；

扫描范围：2～2000Da；

其中，检测的结合态杂环胺包括17种杂环胺，17种杂环胺的定性与定量特征离子及优化的质谱参数为：

杂环胺AαC，保留时间为14.36min，母离子[M+H]为183m/z，子离子140m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s；

杂环胺IQ，保留时间为6.13min，母离子[M+H]为199m/z，子离子130m/z，锥孔电压30V，碰撞电压40eV，驻留时间0.15s；

杂环胺MeIQx，保留时间为6.61min，母离子[M+H]为214m/z，子离子131m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压40eV，驻留时间0.15s；

杂环胺PhIP，保留时间为13.04min，母离子[M+H]为225m/z，子离子210m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s；

杂环胺7,8‑DiMeIQx，保留时间为7.77min，母离子[M+H]为228m/z，子离子213m/z，锥孔电压30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s；

杂环胺DMIP，保留时间为4.20min，母离子[M+H]为163m/z，子离子148m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s；

杂环胺Dorharman，保留时间为10.90min，母离子[M+H]为169m/z，子离子115m/z，锥孔电压30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s;杂环胺Phe‑p‑1，保留时间为13.17min，母离子[M+H]为171m/z，子离子127m/z，锥孔电压30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s;杂环胺1,5,6‑TMIP，保留时间为5.10min，母离子[M+H]为177m/z，子离子162m/z，锥孔电压30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s;杂环胺Harman，保留时间为10.43min，母离子[M+H]为183m/z，子离子115m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s;杂环胺MeAαC，保留时间为17.18min，母离子[M+H]为198m/z，子离子181m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s;杂环胺Glu‑p‑1，保留时间为8.48min，母离子[M+H]为199m/z，子离子145m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s;杂环胺IQx，保留时间为5.26min，母离子[M+H]为200m/z，子离子185m/z，锥孔电压30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s；

杂环胺IQ[4,5‑b]，保留时间为7.65min，母离子[M+H]为199m/z，子离子115m/z，锥孔电压30V，碰撞电压40eV，驻留时间0.15s；

杂环胺MeIQ，保留时间为6.59min，母离子[M+H]为213m/z，子离子198m/z，锥孔电压

30V，碰撞电压25eV，驻留时间0.15s；

杂环胺4,8‑DiMeIQx，保留时间为7.80min，母离子[M+H]为228m/z，子离子212m/z，锥孔电压30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s；

杂环胺4，7，8‑TriMeIQx，保留时间为9.70min，母离子[M+H]为242m/z，子离子227m/z，锥孔电压30V，碰撞电压30eV，驻留时间0.15s。