1.一种基于痕量荧光免疫定量检测PSI-OAm-NAPI两亲聚合纳米药物载体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a、水解PSI-OAm-NAPI，得到水解后的MFAP溶液；

b、制备MFAP的免疫抗原和包被抗原；

c、MFAP纳米药物载体高特异性抗体的制备，所述抗体的效价为1:64000；

d、FITC标记的MFAP荧光抗体的制备；

e、将MFAP包被抗原经包被液稀释后包被于酶标板中，封闭、加入不同浓度的MFAP标准品，以FITC标记的MFAP抗体作为一抗，建立直接竞争荧光免疫分析定量检测MFAP；

f、以MFAP标准品浓度的对数为横坐标，荧光强度值为纵坐标绘制标准曲线，从而定量检测出MFAP的浓度；

所述步骤a具体包括以下步骤：将PSI-OAm-NAPI纳米粒子与聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)溶解于三氯甲烷溶液中，加入新配置的氢氧化钠溶液超声，蒸发除去三氯甲烷；最后经过离心取沉淀分散于PBS中得到水解后的MFAP溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线的线性方程为A＝7558.72-

1365.50lgC，A为荧光强度，C为MFAP的浓度；相关系数R＝-0.997，线性范围为0.48～1.19×

104ng/mL，检出限为0.090ng/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤a具体包括以下步骤：将20～60mg的PSI-OAm-NAPI纳米粒子和0.2～0.6mg的聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)溶解到0.5～5mL三氯甲烷溶液中，溶解后将上述溶液加入到8～16mL浓度为

0.003～0.008mg/mL的氢氧化钠溶液中，超声5～15min，功率200～600W，之后磁力搅拌5～

10min，将溶液于45～65℃下蒸发除去三氯甲烷，于12000～20000r/min离心10～15min，取沉淀分散在0.5～2mL pH＝7.4的PBS缓冲液中，得到水解后的MFAP溶液。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述水解后的MFAP溶液的浓度为2～

10mg/mL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤b具体包括以下步骤：b-1、在1mL水解后的MFAP溶液中加入1mL PBS缓冲溶液，该缓冲液中包含0.1～1mg的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和0.1～1mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，反应

10～20min后加入1～10mg牛血清白蛋白，于25℃下温育2～4h，之后于离心机12000～

20000r/min离心10～15min，取沉淀分散到1mL中性PBS缓冲液中，将溶液装入透析袋中，放入PBS缓冲溶液中透析12小时以上，即可制得MFAP的免疫抗原；

b-2、将步骤b-1中的牛血清白蛋白替换为鸡卵清白蛋白，其他条件保持不变，即可制得MFAP的包被抗原。

6.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于，MFAP的免疫抗原与MFAP的包被抗原的浓度均为1～5mg/mL。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤d具体包括以下步骤：d-1、将MFAP抗体经0.01M，pH＝7.1的PBS缓冲溶液调整至抗体中蛋白浓度为10～20mg/mL，得到MFAP抗体溶液；

d-2、将异硫氰酸荧光素(FITC)溶于碳酸盐缓冲液中，制成浓度为2mg/mL的FITC溶液；

d-3、将步骤d-1和步骤d-2得到的溶液按体积比10:1混合，于18～28℃避光搅拌3～6h；

d-4、将步骤d-3得到的混合液装入透析袋中，于PBS溶液中透析2～4h后，采用凝胶过滤法纯化，即可得到FITC标记的MFAP荧光抗体。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤e具体包括以下步骤：e-1、包被：用碳酸盐缓冲液稀释将MFAP的包被抗原溶液稀释到2～20μg/mL，以每孔70～160μL的量包被96孔酶标板，于0～6℃温育10～14h；之后用洗涤液洗涤2～4次，每次2～5分钟并甩干；

e-2、封闭：每孔加入160～240μL的封闭液，于37℃温育1～2h；之后用洗涤液洗涤2～4次，每次2～5分钟并甩干；

e-3、加样竞争：每孔加入30～60μL不同浓度的MFAP标准液和30～60μL FITC标记的MFAP荧光抗体，37℃温育1.5～4h；之后用洗涤液洗涤2～4次，每次2～5分钟并甩干；

e-4、在酶标仪上测定各孔在激发波长为485nm，发射波长为528nm时的荧光强度。