1.一种PSI-OAm-NAPI两亲聚合纳米材料的定量检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a、水解PSI-OAm-NAPI，得到水解后的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料溶液；

b、制备PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的免疫抗原和包被抗原；

c、制备PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料抗体；所述抗体的效价为1:64000；

d、将PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料包被抗原经包被液稀释后包被于酶标板中，封闭、加入不同浓度的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料标准液，以PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料抗体作为一抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体作为二抗，进行间接竞争酶联免疫分析法；

e、以PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料标准液浓度的对数为横坐标，吸光度值为纵坐标建立标准曲线，从而定量检测出PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的浓度；

所述步骤a具体包括以下步骤：将40 80mg PSI-OAm-NAPI纳米粒子与0.4 0.8mg聚乙二~ ~醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物溶解于1 6mL三氯甲烷溶液中，加入8 16mL浓度为0.002~ ~ ~

0.008mg/mL新配置的氢氧化钠溶液超声，50 60℃蒸发除去三氯甲烷；最后经过离心取沉淀~分散于PBS溶液中得到水解后的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线的线性方程为：A=0.951-

0.104lgC，相关系数R= -0.999，线性范围为0.82 6.31×104ng/mL，检出限为0.057 ng/mL；

~

其中， A为490nm处吸光度值，C为PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的浓度。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水解后的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料溶液的浓度为2 10mg/mL。

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4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤b具体包括以下步骤：b-1、将N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和牛血清白蛋白加入到水解后的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料溶液中，18 29℃温育2 6小时后离~ ~心分离，将沉淀分散到中性PBS缓冲液中得到免疫抗原溶液，将溶液装入透析袋中，放入PBS缓冲溶液中透析过夜，即可制得PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的免疫抗原；

b-2、将步骤b-1中的牛血清白蛋白替换为鸡卵清白蛋白，其他条件保持不变，即可制得PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的包被抗原。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤b具体包括以下步骤：b-1、向2mL步骤a得到的水解后的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料溶液中加入包含有

0.2 2 mg的N-羟基琥珀酰亚胺和0.2 2mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸~ ~盐的2mLPBS缓冲溶液，震荡反应20 30min后加入2 10mg牛血清白蛋白，于25℃下反应2 4 ~ ~ ~h，之后于离心机12000 20000r/min离心10 15min，取沉淀分散到PBS缓冲液中，得到免疫抗~ ~原溶液，将溶液装入透析袋中，放入PBS缓冲溶液中透析过夜，即可制得PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的免疫抗原，其浓度为1 5mg/mL；

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b-2、将步骤b-1中的牛血清白蛋白替换为鸡卵清白蛋白，其他条件保持不变，即可制得PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料的包被抗原，其浓度为1 5mg/mL。

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6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤c具体包括以下步骤：c-1、首次免疫：将PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料免疫原与福氏完全佐剂等体积比混合后，背部皮下多点注射到动物体内，注射8 10个点，注射量为0.5 1.0mg/kg/次；首次免疫~ ~三周后进行加强免疫；

c-2、加强免疫：将PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料免疫原与福氏不完全佐剂等体积比混合后，采取同样的方式注射到动物体内，注射量为0.5 1.0mg/kg/次；此后每两周再进行~一次加强免疫，期间采血测效价，直到抗体效价达到1:64000，一周后采血，纯化得到PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料抗体。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤d具体包括以下步骤：d-1、将PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料包被抗原溶液用碳酸盐缓冲液稀释到2 10µg/~mL包被96孔酶标板，以80 150µL/孔的量包被并于4 ℃冰箱内培养过夜；之后用PBST洗涤液~洗涤酶标板2 5次，每次3 6min最后一次需拍干；

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d-2、加入质量分数1% 5%酪蛋白封闭液，200 250µL/孔，37℃温育1.5 2h；之后用PBST~ ~ ~洗涤液洗涤酶标板2 5次，每次3 6min最后一次需拍干；

~ ~

d-3、每孔加入40 60µL不同浓度的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料标准液和40 60µL1~ ~

5µg/mL的PSI-OAM-NAPI两亲聚合纳米材料抗体，37℃温育2 4h；之后用PBST洗涤液洗涤酶~ ~标板2 5次，每次3 6min最后一次需拍干；

~ ~

d-4、加酶：每孔加入80 150µL经PBS稀释后的稀释比为1：5000的辣根过氧化物酶标记~的羊抗兔抗体，37℃温育2 4h；之后用PBST洗涤液洗涤酶标板2 5次，每次3 6min最后一次~ ~ ~需拍干；

d-5：显色: 每孔加入50 100µL邻苯二胺底物液进行显色反应，37℃显色15 45min；

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d-6、终止：每孔加入50~100µL H2SO4终止反应，在酶标仪上测定各孔在490nm处的吸光值。