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专利号: 2017105187395
申请人: 浙江理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.五种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:包括如下5对病毒特异性组合引物:

PEDV-uF:GGCATCGCATAACATAAGCA-AACACGGCGACTACTCAGCPEDV-uR:CGTCCGTCCAACCGTCTG-GCCTTCTTTAGCAACCCAGTGEV-uF:GGCATCGCATAACATAAGCA-GTGGTGTTAGGTGATTATTTTCCTGEV-uR:CGTCCGTCCAACCGTCTG-TATGGTTTAACCTGCACTCACTAGAR-uF:GGCATCGCATAACATAAGCA-TATGCAATACCAGTAGGACCAGGAR-uR:CGTCCGTCCAACCGTCTG-GCTCTACGTAGCGAGTATGAAATCGCR-uF:GGCATCGCATAACATAAGCA-TGTTGCATCCGTGAAGAGAATGGTGCR-uR:CGTCCGTCCAACCGTCTG-GCATTAGCCCCTACGCAAGCPCV2-uF:GGCATCGCATAACATAAGCA-AAGAAGCGGACCCCAACPCV2-uR:CGTCCGTCCAACCGTCTG-AGGTGGCCCCACAATGA;

还包括如下通用引物对:

UF:GGCATCGCATAACATAAGCAUR:CGTCCGTCCAACCGTCTG。

2.根据权利要求1所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于还包括如下5对病毒特异性引物:PEDV-F:AACACGGCGACTACTCAGCPEDV-R:GCCTTCTTTAGCAACCCAGTGEV-F:GTGGTGTTAGGTGATTATTTTCCTGEV-R:TATGGTTTAACCTGCACTCACTAGAR-F:TATGCAATACCAGTAGGACCAGGAR-R:GCTCTACGTAGCGAGTATGAAATCGCR-F:TGTTGCATCCGTGAAGAGAATGGTGCR-R:GCATTAGCCCCTACGCAAGCPCV2-F:AAGAAGCGGACCCCAACPCV2-R:AGGTGGCCCCACAATGA。

3.根据权利要求1或2所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括:a)PCR反应液、b)PCR标准品、c)阳性对照品、d)阴性对照品、e)引物。

4.根据权利要求3所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:所述PCR标准品由以下5种标准品组成:PEDV标准品、TGEV标准品、GAR标准品、GCR标准品、PCV2标准品。

5.根据权利要求3所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:所述PCR反应液包含PCR反应缓冲液,耐热DNA聚合酶;所述PCR反应缓冲液含有缓冲液,氯化镁和三磷酸脱氧核糖核苷酸混合物;

所述阳性对照品含TGEV、GAR、GCR、PEDV和PCV2五种病毒的阳性质粒混合品;

所述阴性对照品为灭菌后焦碳酸二乙酯处理水。

6.根据权利要求3所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:5种猪腹泻病毒的病毒特异性组合引物、病毒特异性引物和通用引物的上下游引物同管包装。

7.根据权利要求3所述的5种猪腹泻病毒富集多重PCR快速诊断试剂盒,其特征在于:所述试剂盒避光保存于-20℃。

8.如权利要求1~7任一所述的试剂盒在同时特异检测5种猪腹泻病毒感染中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:5种猪腹泻病毒为TGEV、GAR、GCR、PEDV和PCV2。