欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2017105457553
申请人: 辽宁大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.测定肠内菌中芍药苷代谢物的液质联用方法,其特征在于包括如下步骤:

1)肠内菌的制备:取粪便,在无菌无氧操作条件下,将粪便放入到一个充满氮气的自封袋中,使粪便均质化,然后放入到灭菌完毕的GAM培养基中,轻轻振摇,置无菌厌氧恒温培养箱中,在37℃下培养24h;

2)芍药苷的肠内菌转化:在无菌厌氧培养箱中,向培养的肠内菌中加入芍药苷,然后放置在37℃恒温摇床上振摇,速度为100r/min,培养2-24h,取出,加入乙酸乙酯终止反应,得芍药苷的肠内菌代谢产物;

3)样品处理:采用萃取液萃取芍药苷的肠内菌代谢产物三次,合并有机相,旋转蒸干,再用甲醇转移至EP管中,过0.22μm微孔滤膜,获得代谢产物样品;

4)样品测定:具体条件如下:色谱条件:色谱柱:Dikma DiamonsilTMODS C18色谱柱;

洗脱时间:t=50min;

进样量:10μL;

检测波长:λ=230nm;

柱温:30℃;

流速:0.5mL/min;

流动相:水+甲醇,采用梯度洗脱,程序如表1所示;

表1

时间min 流速mL/min 水% 甲醇%

0 0.5 85 15

10 0.5 70 30

20 0.5 60 40

35 0.5 0 100

50 0.5 0 100

质谱条件:一级质谱:电离模式:电喷雾电离ESI;

扫描模式:正离子扫描;

电喷雾电压:4.0bar;

干燥气流速:10L/min;

干燥气温度:200℃;

二级质谱:电离模式:电喷雾电离ESI;

扫描模式:正离子扫描;

碰撞气:氮气;

毛细管电压:2.8kV;

锥孔电压:3.0V;

源温度:110℃;

脱溶剂温度:350℃;

脱溶剂气体流量:50L/Hr;

碰撞能量:15-35eV。

2.根据权利要求1所述的测定肠内菌中芍药苷代谢物的液质联用方法,其特征在于,所述的粪便来源于人体或动物体。

3.根据权利要求1所述的测定肠内菌中芍药苷代谢物的液质联用方法,其特征在于,步骤3)中,所述的萃取液为水饱和的乙酸乙酯溶液。

4.根据权利要求1所述的测定肠内菌中芍药苷代谢物的液质联用方法,其特征在于,步骤3)中,所述的萃取液为水饱和的甲基叔丁基醚溶液。

5.根据权利要求1所述的测定肠内菌中芍药苷代谢物的液质联用方法,其特征在于,所述的色谱柱,型号为DiamonsilTMODS C18色谱250mm×4.6mm,5μm。