1.一种从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)采收杨桃根,晾干后粉碎为粗粉;
2)取杨桃根粗粉投入水中浸泡,加热至沸腾后,煎煮0.8-1.2小时,过滤,重复以上步骤
3次,得到水提取液;浓缩;再向其中加入乙醇,沉淀过夜,抽滤,取上清液,浓缩,得浓缩上清液;
3)对步骤2)得到的浓缩上清液应用色谱柱进行洗脱粗分,洗脱梯度为:水→第一乙醇溶液→第二乙醇溶液→第三乙醇溶液→第四乙醇溶液,其中乙醇浓度依次增高;然后分别浓缩,依次得到水洗脱部位浸膏1、第一乙醇洗脱部位浸膏2、第二乙醇洗脱部位浸膏3、第三乙醇洗脱部位浸膏4和第四乙醇洗脱部位浸膏5;
4)取步骤3)得到的第二乙醇洗脱部位浸膏3,应用色谱柱以氯仿-甲醇系统分7个梯度洗脱,其中,氯仿的体积分数由高至低,每个梯度洗脱三个柱体积,依次得到流份6-12;
5)对步骤4)得到的流份10进行色谱柱分离,以甲醇-水系统分9个梯度洗脱,其中,甲醇的体积分数由低至高,每个梯度洗脱三个柱体积,依次得到流份13-21;
6)对步骤5)得到的洗脱流份14进行色谱柱分离,以甲醇-水系统分7个梯度洗脱,其中,甲醇的体积分数由低至高,每个梯度洗脱三个柱体积,依次得到流份22-28;
7)对步骤6)得到的洗脱流份23进行色谱柱分离,应用色谱柱以氯仿-甲醇系统分3个梯度洗脱,其中,氯仿的体积分数由高至低,每个梯度洗脱三个柱体积,依次得到流份29-31,
31号流份浓缩后干燥,即得目标产物α-葡萄糖苷酶抑制剂。
2.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,采收杨桃根,晾干后粉碎为粗粉,粗粉的粒径为10-20目。
3.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤2)中,水的重量为投入其中的杨桃根粗粉重量的18-22倍;乙醇的体积为水提取液体积的3倍。
4.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤2)中,每2Kg杨桃根粗粉经浸泡、煮沸、过滤后得到的水提取液,对应浓缩至1.5L。
5.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤3)中,采用以DIANION HP20树脂位填料的色谱柱对步骤2)得到的上清液进行洗脱粗分。
6.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤4)中,取步骤3)得到的第二乙醇洗脱部位浸膏3,应用色谱柱以氯仿-甲醇系统梯度洗脱,具体为:取15g步骤3)得到的乙醇洗脱部位浸膏3,加少量95%乙醇溶解,用硅胶15g拌样,干燥至恒重,用氯仿浸泡过24小时的硅胶340g装柱,上样,然后用氯仿-甲醇系统进行梯度洗脱,共设7个梯度,即氯仿和甲醇的体积比依次为15:1→10:1→8:1→6:1→4:1→2:1→
1:1,每个梯度洗脱三个柱体积。
7.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述第一乙醇溶液的体积分数为20%,第二乙醇溶液的体积分数为40%,第三乙醇溶液的体积分数为70%,第四乙醇溶液的体积分数为95%。
8.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤5)中,对步骤4)得到的流份10进行色谱柱分离,以甲醇-水系统梯度洗脱,具体为:将步骤4)得到的流份10溶于少量50%甲醇中,用MCI Gel为填料进行装柱,上样,然后以甲醇-水系统进行梯度洗脱,共设9个梯度,即甲醇和水的体积比依次为10:90→20:80→30:70→40:
60→50:50→60:40→70:30→80:20→100:0,每个梯度洗脱三个柱体积。
9.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤6)中,对步骤5)得到的流份14进行色谱柱分离,以甲醇-水系统梯度洗脱,具体为:将步骤5)得到的流份14溶于少量50%甲醇中,用RP-18为填料进行装柱,上样,然后以甲醇-水系统进行梯度洗脱,共设7个梯度,即甲醇和水的体积比依次为10:90→20:80→30:70→40:60→50:50→60:40→70:30,每个梯度洗脱三个柱体积。
10.如权利要求1所述的从杨桃根中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法,其特征在于,所述步骤7)中,对步骤6)得到的流份23进行色谱柱分离,以氯仿-甲醇系统梯度洗脱,具体为:将步骤6)得到的流份23溶于甲醇中,用1g硅胶进行拌样,干燥至恒重,用氯仿浸泡过24小时的硅胶20g装柱,上样,然后用氯仿-甲醇系统进行梯度洗脱,共设3个梯度,即氯仿和甲醇的体积比依次为15:1→10:1→5:1,每个梯度洗脱三个柱体积,依次得到流份29-31,将31号流份浓缩后干燥,即得目标产物α-葡萄糖苷酶抑制剂。