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专利号: 2017105665293
申请人: 山东师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于多种柽柳的统一化组织培养快速繁殖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)外植体:扦插盆栽苗抽出的新嫩枝条为外植体;

(2)外植体的消毒:选用75%C2H5OH和0.1%HgCl2,消毒时间分别为30s、9min;

(3)增殖培养:消毒培养后的无菌苗,MS培养基为基本培养基,添加6-BA和NAA进行培养,培养40-50天;

(4)壮苗培养:将柽柳增殖培养产生的丛生苗转入MS培养基进行壮苗培养,培养15-25天;

(5)生根培养:经壮苗长高后的组培苗,剪成小段,采用无激素培养基进行生根培养,培养15-25天;

(6)炼苗移栽:炼苗基质为营养土添加少许沙子;炼苗时首先将组培瓶上封口膜松动但–2 –1不打开,在温度为22±1℃,光强度800±100μmol·m ·s 的组培室进行炼苗两天,再将组培瓶的封口膜上轻轻打开少许缝隙后炼苗两天,接着将封口膜打开后盖在组培瓶上炼苗两天后进行移栽;移栽的前一天用多菌灵对移栽基质进行消毒,移栽时选择根长为1.5-2cm、生根条数为2-3条、生长健壮的组培苗进行移栽,移栽时将组培苗从培养基中取出,用清水将根部的培养基清洗干净,用多菌灵溶液浸泡根部15s,移栽到盛有灭过菌的基质中,移栽后覆膜培养,早晚喷水,一周后,覆盖膜打开少许,继续培养一周后,揭膜培养,保持土壤湿润,培养30天后移栽到大田;

步骤(3)-(5)中培养条件为:培养温度白天25±1℃,夜晚18±1℃,光照强度为200±

100μmol·m–2·s–1,光照12-14h,黑暗10-12h;

所述柽柳为甘蒙柽柳(TamarixchinensisNakai)、红花多枝柽柳(TamarixhohenackeriBunge)、中国柽柳(TamarixchinensisLour.);

步骤(3)中,甘蒙柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,中国柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.7mg/L,红花多枝柽柳的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.7mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,消毒过程中,以MS培养基为基本培养基,首先对剪取的柽柳嫩枝条进行清洗,清洗干净后用水冲洗,再把柽柳嫩枝条每段剪成3-4cm,用水冲洗30min后拿到超净环境内,先用无菌水冲洗三遍,然后用75%的酒精浸泡一定时间,再用0.1%升汞浸泡一定时间,接着用无菌水冲洗4-5次,吸干外植体表面的水,剪去茎段上下各5mm的部分,下端剪成斜面,插到MS培养基中。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,增殖培养45天。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述无激素培养基为MS培养基或1/2MS。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述无激素培养基为MS培养基。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)、(5)中各培养20天。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(6)中,炼苗基质选用营养土添加1/10的沙子。