1.一种循环肿瘤DNA检测探针,其特征在于,包括:金纳米粒子-适配体复合物及包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白-抗体复合物。
2.一种循环肿瘤DNA检测传感器,其特征在于,包括:丝网印刷电极以及设置在其上的金纳米粒子-适配体复合物与包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白-抗体复合物。
3.如权利要求2所述的循环肿瘤DNA检测传感器,其特征在于,所述金纳米粒子-适配体复合物的制备方法包括:按照2∶1的体积比,依次将金纳米粒子AuNPs和适配体Aptamer混合均匀,室温避光静置;
加入等量的磷酸缓冲盐溶液PBS,室温避光静置;
加入氯化钠NaCl溶液,使溶液中NaCl的浓度调节至0.05M,随后室温静中将NaCl的浓度调节至0.1M;
在12,000rpm条件下离心30min,弃去上层清液,用0.1M的NaCl和PBS缓冲液润洗下层固体,储存在0.02%(v/v)吐温20(Tween 20)水溶液中。
4.如权利要求2所述的循环肿瘤DNA检测传感器,其特征在于,包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白-抗体复合物的制备方法包括:将包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白加入至含有可溶于水的碳二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS的2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)缓冲溶液中并超声30分钟;
所得混合溶液以不低于10000rpm离心5分钟,弃去上层清液;
向离心后得到的沉淀中加入5-甲基胞嘧啶单克隆抗体(1mg/mL),室温下孵化3小时;
混合液在10,000rpm条件下离心10min,弃去上层清液,用PBS润洗下层固体,用PBS缓冲溶液储存4℃冰箱中备用。
5.一种循环肿瘤DNA检测方法,其特征在于,包括:
将待检样本与金纳米粒子-适配体复合物Aptamer-AuNPs混合;
再将包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白-抗体复合物mAb-LPA加入到上述混合物中;
用微分脉冲伏安法进行电化学检测,在扫速为50mV/s,电位扫描范围-0.9~-0.3V条件下检测包裹了磷酸铅的去铁铁蛋白LPA的信号,测定样品中ctDNA(PIK3CA E542K)的含量。