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专利号: 2017106231198
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-26
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种特异性过敏检测方法,其特征在于,所述过敏检测方法包括以下步骤:(1)由内含荧光分子的中空介孔二氧化硅连接抗免疫球蛋白E抗体作为荧光探针;

(2)由二氧化硅包覆四氧化三铁制备所得的Fe3O4@SiO2连接过敏原作为磁性探针;

(3)将步骤(1)的荧光探针和步骤(2)的磁性探针同时加入含有特异性免疫球蛋白E的血清中;

(4)孵育,离心去上清,采用缓冲液冲洗后加入碱液,然后超声释放荧光分子,检测荧光强度。

2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述荧光探针为粒径为190-210nm,内径为

120-140nm;或粒径为110-120nm,内径为60-70nm。

3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述磁性探针的粒径为100-120nm。

4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述方法中血清溶液pH 11,孵育时间为

120min,孵育温度为37℃。

5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述方法还包括:(1)取含有不同浓度特异性免疫球蛋白E的血清溶液,利用权利要求1所述方法测定荧光强度;

(2)构建特异性免疫球蛋白E浓度与荧光强度的回归方程;

(3)将待检测血清采用相同的方法检测荧光强度,带入步骤(2)中的回归方程,计算待检测血清中特异性免疫球蛋白E浓度。

6.权利要求1所述方法在特异性过敏检测中的应用。

7.权利要求1所述方法在检测刀额新对虾特异性免疫球蛋白E中的应用。

8.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述应用是采用粒径为190-210nm,内径为

120-140nm的荧光探针作为抗免疫球蛋白E抗体的载体,粒径为100-120nm的磁性探针Fe3O4@SiO2作为过敏原载体,两种材料同时捕获靶标刀额新对虾特异性免疫球蛋白E,利用Fe3O4@SiO2的磁性快速富集和分离靶标;所述应用的回归方程为:y=6489-0.02037*208.3-x-

456.7249*0.5113x,R2=0.9959,特异性免疫球蛋白E最低检测限为0.0159ng/mL。

9.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述应用是采用粒径为110-120nm,内径为

60-70nm的荧光探针作为抗免疫球蛋白E抗体的载体,粒径为100-120nm的磁性探针Fe3O4@SiO2作为过敏原载体,两种材料同时捕获靶标刀额新对虾特异性免疫球蛋白E,利用Fe3O4@SiO2的磁性快速富集和分离靶标;所述应用的回归方程为:y=2119-12270x,R2=0.9908,特异性免疫球蛋白E最低检测限为0.0180ng/mL。

10.根据权利要求7所述应用,其特征在于,所述过敏原为原肌球蛋白或精氨酸激酶。